权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ウイルソン病モデルラット(LECラット)に見られる銅トランスポーターの機能異常

在威尔逊病模型大鼠（LEC 大鼠）中观察到铜转运蛋白的功能异常

基本信息

批准号：
07276204
负责人：
杉山俊博
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07276204/
关键词：
ウィルソン病銅トランスポータ PタイプATPase LECラット遺伝子治療

项目摘要

近年、ヒトウィルソン病の原因遺伝子としてP-type ATPaseに属する、銅のトランスポーター蛋白をコードしているATP7B遺伝子が同定された。一方、ヒトウィルソン病と同様に肝臓内の銅異常蓄積を呈するLECラットにおいてもこの遺伝子の異常が見つかり、このラットが、ヒトウィルソン病の動物モデルでとして有用であることが明らかにされている。しかし、ATP7B遺伝子の異常が、銅代謝異常を引き起こしているという直接的な証拠は未だ示されておらず、また、この遺伝子産物である銅トランスポーターの細胞内での動態および機能も完全には明らかにされていない。そこで、まず、LECラットでは、銅の肝臓から血中への排出低下が見られることから、その障害部位を同定するために、肝細胞の細胞内分画を行った。この結果、ゴルジ装置において銅がセルロプラスミンに結合できず、銅を持たないセルロプラスミンが血中に分泌されることがわかった。次に、この銅トランスポーターの細胞内での局在を調べるために、ATP7B遺伝子を、リン酸カルシュウム法により培養細胞に導入した。一過性発現を見た場合、銅トランスポーターは、ゴルジ装置に局在していることが蛍光抗体法により明らかになった。以上のことより、ヒトウィルソン病の動物モデルであるLECラットでは、異常な銅トランスポーターがゴルジ装置にあるために、セルロプラスミンが銅を持たずに分泌され、銅が肝臓内に蓄積するものと考えられた。今後は、種々の変異を持ったATP7B遺伝子を細胞に導入し、銅トランスポーターの機能発現に必要な構造をより詳細に明らかにする。さらに、LECラットの肝臓にATP7B遺伝子をアデノウィルスを用いて導入し、ウィルソン病に対する遺伝子治療のモデルとする。

In recent years, ATP7B gene has been identified as the causative factor of the disease. The abnormal accumulation of copper in the liver was observed in the animals with the disease. Abnormality of ATP7B gene and abnormality of copper metabolism are caused by direct evidence. The intracellular dynamics and functions of ATP 7 B gene and copper metabolism products are completely revealed. In addition, the liver and liver cells are isolated from each other and the intracellular distribution of copper and copper in the liver and blood is also determined. As a result, the copper in the device is combined with the copper in the blood. In addition, the regulation of ATP 7B gene in the intracellular cells was studied. In the case of transient occurrence, the light antibody method is used to detect the light in the light source. The above is the first time that a patient has been diagnosed with a disease, and the first time that a patient has been diagnosed with a disease, the second time that a patient has been diagnosed with a disease, the third time that a patient has been diagnosed with a disease. In the future, we will introduce ATP 7B gene into cells and explain the necessary structure for functional development. In addition, the LEC gene has been introduced into the liver for a long time.