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ラット肝発癌過程に出現するoval cellの肝細胞への分化能

大鼠肝癌发生过程中卵圆细胞分化为肝细胞的能力

基本信息

批准号：
08265203
负责人：
杉山俊博
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Akita University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08265203/
关键词：
LECラット oval cell 肝臓始原細胞肝細胞分化肝細胞転写因子

项目摘要

【方法と結果】1.銅異常蓄積のために生後3-4か月において劇症肝炎を起こしたLECラット肝臓からコラ-ゲナーゼ灌流法を用いてoval cellを分離できた。2.肝細胞の分化マーカーとして肝細胞特異的転写因子,前癌病巣をγ-GTP,GST-P,AFP,肝細胞と胆管上皮細胞にはalbumin,cytokeratin 18と19の抗体を用いて、免疫組織的・生化学的により検索した。その結果、肝臓始原細胞の細胞源としてより頻度の多いLECラットを用いて、目的の細胞を容易にしかも大量に得た。分離したoval cellは、現在まで1年間以上長期細胞培養が可能であり、また凍結保存できた。細胞染色法から、γ-GTP,GST-P,AFP,cytokeratin 18と19は陽性であったが、albuminは陰性であった。肝細胞転写因子のうち、HNF-3βmRNAのみが発現していたが、他の4つの転写因子、HNF-3α,HNF-1α,HNF-4,C/EBPはいずれも発現していなかった。さらに3.このoval cellを無アルブミンラットに移植したところ、移植した細胞は肝細胞に形態学的にも変化し、また免疫組織学的にもアルブミンの産生が認められた。以上の結果、oval cellは、胆管上皮細胞と肝細胞の両方の性質を発現する多分化能を有している細胞であることが判明した。【考察】LECラットより分離されたoval cellは、肝細胞系と胆管上皮細胞系の両方をあわせ持ち、HNF-3βのみの肝細胞転写因子の発現を認めたことにより、肝臓細胞としては未分化な状態にあると思われた。しかし、肝臓に移植することで、アルブミンの分泌能を持つ細胞に分化しうることが明かにできた。

[methods] results: 1. During the 3-4 months after birth, the patients were often diagnosed with hepatitis, LEC, liver, liver two。 The cellular differentiation of the liver is closely related to the writing factors of the cellular characteristics of the liver, γ-GTP,GST-P,AFP of the precancerous disease, albumin,cytokeratin 18-19 of the biliary epithelial cells of the hepatocytes, and biochemical markers of the immune tissue. The results showed that the primary cell cycle of the liver was much higher than that of the LEC cell, and the target cell was easy to get a large amount of it. It is possible to separate and save the oval cell for more than one year. Cell staining, γ-GTP,GST-P,AFP,cytokeratin 18-19 and albumin staining were used in this study. The expression of HNF--3 β-mRNAs and HNF-3-α, HNF-1-α, HNF-4,C/EBP-α and mRNA in liver cells were detected by RT-PCR, RT-PCR, RT-PCR and Elisa. I don't know. 3. There is no significant difference between oval cell and immunology in transplantation, liver morphology, immunology and immunology. The above results, oval cell, bile duct epithelial cells and liver cells showed that multiple differentiation could be detected. [investigation] LECs were isolated from oval cell, hepatocytes, biliary epithelial cells, biliary epithelial cells, HNF-3 β, hepatocytes, biliary epithelial cells, bile duct epithelial cells, bile duct epithelial cells, biliary epithelial cells, biliary epithelial cells, bile duct epithelial cells, biliary epithelial cells, bile duct epithelial cells, biliary epithelial cells, bile duct epithelial cells, Liver transplantation, liver transplantation and liver transplantation.