歯冠形成に必須な細胞外マトリックスの産生と再構築に働く上皮-間葉相互作用の解明

阐明上皮间质相互作用在牙冠形成所必需的细胞外基质的产生和重塑中发挥作用

• 批准号: 07F07214
• 负责人: 杉山 俊博
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07214/
• 关键词: 細胞工学; 歯胚; エナメル芽細胞; 象牙芽細胞; 歯再生

自発的に不死化された間葉系細胞系を用いた歯胚の再生機構について、in vitro三次元歯胚器官培養法およびでin vivo細胞移植法を用いて行った。E14.5マウス歯胚から解剖学的に分離し、dispase IIとDNase Iを用いて酵素処理を行い、胚葉性上皮組織を得た。次に分離した胚葉性上皮組織と我々が樹立した象牙芽前駆細胞odontoblast-lineage cells(OLC)とをコラーゲンドロップ内で三次元的に再配置した。in vitro再構成培養系の開始後3日目でも、播種したOLCは円柱状の構造を保っていたが、2週間後になると、OLC細胞塊は外見的に上皮組織周囲で収縮した。次に、このような三次元的に再配置したOLC-上皮組織をマウスの腎皮膜下に移植し、2週間観察した。in vivoにおけるグループVI(胎生14.5日目の上皮組織とOLC)の組織切片は、コラーゲンを含んだ青色のデンチン層と脱石灰化した赤茶色のエナメル層とが明らかに区別された。GFP陽性の細胞は免疫組織染色法により移植部で観察でき、OLCがバイオ再生医学で形成した歯胚に存在していることが明らかになった。グループIVの組み合わせの内3分の2で、しかしながら、不規則な組織形成を観察した。OLCの球形の再構成体内には、GFP陽性領域に出現しており、in vitroで最もよく観察された。in vivo実験では、円形をした骨芽細胞様の細胞からなる骨様形成領域に囲まれたケラチン層が観察された。これらの結果から、移植した3分の1が歯組織に分化した。OLC由来GFP陽性の細胞は免疫組織染色法にて石灰化した歯胚に存在していることを証明できた。OLCは上皮-間葉系相互作用により機能を持った象牙芽細胞に分化したことが分かった。以上のことから、我々は歯再生実験において、OLCは歯間葉系組織に充分代替できる細胞であることが判明した。従って、我々が樹立したOLCは歯の分化・再生過程において有用な研究材料になると思われる。

Self-developed embryonic stem cell lines are used in vitro three-dimensional embryonic organ culture and in vivo cell transplantation. E14.5 Dispase II and DNase I are used to isolate embryonic tissue from embryonic tissue. In addition, the embryonic epithelial tissue was isolated and reorganized into odontoblast-lineage cells(OLC). 3 days after the start of the in vitro reconstituted culture system, the columnar structure of OLC cells was preserved, and 2 weeks later, the epithelial tissue of OLC cells was reduced. Next, the three dimensional reconfiguration of OLC-epithelial tissue was observed in 2 weeks. In vivo, the tissue section of the epithelial tissue of the eye (OLC) at 14.5 days of birth is divided into two layers: cyan layer and decalcification layer. GFP-positive cells were detected by immunohistochemical staining in the transplanted part, and OLC was found in the embryonic form of regenerative medicine. The fourth group is composed of three parts, two parts and three parts, and the formation of irregular tissues is observed. OLC's spherical re-constitution in vivo, GFP positive areas appear in vitro and most frequently observed. In vivo, the bone bud cells were observed in the field of bone formation. The results of this study are as follows: 1. OLC is derived from GFP positive cells and proved by immunohistochemical staining. OLC epithelial-mesenchymal interaction, function, differentiation and differentiation The above mentioned cells were identified by OLC. We have established the concept of OLC as a useful research material for the differentiation and regeneration process of dental implants.

项目成果

Differentiation of an ameloblast-lineage cell line (ALC) is induced by Sonic hedgehog signaling

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.12.053
• 发表时间: 2007-02-09
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Takahashi, Satomi;Kawashima, Nobuyuki;Suda, Hideaki
• 通讯作者: Suda, Hideaki

Nerve Growth Factor Promotes Differentiation of Odontoblast-Like Cells

• DOI: 10.1002/jcb.22006
• 发表时间: 2009-03-01
• 期刊: JOURNAL OF CELLULAR BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 4
• 作者: Arany, Szilvia;Koyota, Souichi;Sugiyama, Toshihiro
• 通讯作者: Sugiyama, Toshihiro

Acute effects on the lung and the liver of oral administration of cerium chloride on adult, neonatal and fetal mice

• DOI: 10.1016/j.jtemb.2007.08.003
• 发表时间: 2008-01-01
• 期刊: JOURNAL OF TRACE ELEMENTS IN MEDICINE AND BIOLOGY
• 影响因子: 3.5
• 作者: Kawagoe, Masami;Ishikawa, Kiyoshi;Sugiyama, Toshihiro
• 通讯作者: Sugiyama, Toshihiro

Application of spontaneously immortalized odontoblast cells in tooth regeneration

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2009.02.025
• 发表时间: 2009-03-27
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Arany, Szilvia;Kawagoe, Masami;Sugiyama, Toshihiro
• 通讯作者: Sugiyama, Toshihiro

Proteomic analysis identifies proteins that continue to grow hepatic stem-like cells without differentiation.

• DOI: 10.1007/s10616-008-9122-7
• 发表时间: 2008-06
• 期刊: CYTOTECHNOLOGY
• 影响因子: 2.2
• 作者: Saheki, Toshihiko;Ito, Hitomi;Sekiguchi, Akihiro;Nishina, Atsuyoshi;Sugiyama, Toshihiro;Izumi, Takashi;Kojima, Itaru
• 通讯作者: Kojima, Itaru