IL-10の作用機序解析を通じた慢性炎症性腸疾患の発症機構の解明

通过分析IL-10的作用机制阐明慢性炎症性肠病的发病机制

• 批准号: 15689009
• 负责人: 竹田 潔
• 金额: $ 12.56万
• 依托单位: Kyushu University (2004)Osaka University (2003)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15689009/
• 关键词: IL-10; STAT3; 慢性大腸炎; ノックアウトマウス; 自然免疫; マクロファージ; 慢性腸炎; サイトカイン

これまでにSTAT3をマクロファージで特異的に欠失させたマウスを作製し、STAT3がマクロファージでのIL-10シグナルに必須であり、マクロファージの機能抑制、さらには生体レベルで慢性炎症の抑制に必須であることを明らかにした。そして、病原体構成成分を認識するToll-like receptor(TLR)ファミリーが、STAT3非存在下でマクロファージの異常活性化による慢性腸炎の発症のトリガーとなることを、TLR4/STAT3二重変異マウスの解析により明らかにした。さらに、IL-10刺激によりマクロファージで誘導されるBcl-3が、TLR刺激依存性のTNF-α産生を特異的に抑制していることを明らかにした。今年度は、大腸粘膜固有層に存在するマクロファージの機能を解析した。その結果、正常マウスの大腸粘膜固有層マクロファージは、TLR刺激依存性の炎症性サイトカインの産生が認められないが、慢性腸炎を発症するIL-10ノックアウトマウスやSTAT3変異マウス由来の細胞はTLR刺激依存性に炎症性サイトカインを産生した。そこで正常マウスとIL-10ノックアウトマウスの大腸粘膜固有層マクロファージ間でTLR応答性が異なる分子機構を解析するため、両者間で遺伝子発現の差をDNAマイクロアレイで解析した。その結果、Bcl-3と同じIκBファミリーに属するIκBNSがBc1-3とともに正常大腸粘膜固有層マクロファージに特異的に発現していることを見出した。IκBNSをマクロファージに発現させると、LPS刺激依存性のIL-6産生が特異的に減少していた。さらにIκBNSを発現した細胞では、NF-κBのDNA結合能に障害が認められた。さらに、IκBNSはIL-6プロモーターにp50NF-κBサブユニットと共に恒常的に会合していることがクロマチン免疫沈降法の解析から明らかになった。さらに、RNAiによるIκBNSのノックダウンマクロファージでは、LPS刺激依存性のIL-6産生が特異的に増加していた。以上の結果から、正常大腸粘膜固有層マクロファージに恒常的に発現しているIκBNSがマクロファージ系細胞において、IL-6産生の抑制に特異的に関与していることが明らかになった。

こ れ ま で に STAT3 を マ ク ロ フ ァ ー ジ で specific に owe lost さ せ た マ ウ ス を as し, STAT3 が マ ク ロ フ ァ ー ジ で の IL - 10 シ グ ナ ル に must で あ り, マ ク ロ フ ァ ー ジ の function inhibition, さ ら に は raw body レ ベ ル で chronic inflammation の must suppress に で あ る こ と を Ming ら か に し た. Youdaoplaceholder0 て て, components of pathogens を, understanding するToll-like Receptor (TLR) フ ァ ミ リ ー が and STAT3 the presence of で マ ク ロ フ ァ ー ジ の abnormal activation に よ る chronic enteritis の 発 disease の ト リ ガ ー と な る こ と を, TLR4 / STAT3, double - vision マ ウ ス の parsing に よ り Ming ら か に し た. さ ら に, IL - 10 stimulus に よ り マ ク ロ フ ァ ー ジ で induced さ れ る Bcl - 3 が, TLR stimulation dependency の TNF alpha を specific に an adverse し て い る こ と を Ming ら か に し た. This year, the に and the lamina lamina of the large intestine mucosa have the following functions: する する ロファ ロファ ジ ジ ジ を を を analysis of た た た. そ の results, normal マ ウ ス の colon mucosa lamina propria マ ク ロ フ ァ ー ジ は, TLR stimulation dependency の inflammatory サ イ ト カ イ ン の produce が recognize め ら れ な い が, chronic enteritis を 発 disease す る IL - 10 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス や STAT3 - different マ ウ ス origin の cells は TLR stimulus dependency に inflammatory サ イ ト カ イ ン を produce し た . そ こ で normal マ ウ ス と IL - 10 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の colon mucosa lamina propria マ ク ロ フ ァ ー ジ between で TLR 応 a sexual が different な る molecular institutions を parsing す る た め, struck between で heritage 伝 poor child 発 now の を DNA マ イ ク ロ ア レ イ で parsing し た. そ の results, the Bcl - 3 と じ I kappa B predominate フ ァ ミ リ ー に genus す る I kappa BNS predominate が Bc1-3 と と も に normal colon mucosa lamina propria マ ク ロ フ ァ ー ジ に specific に 発 now し て い る こ と を shows し た. IκBNSを を ロファ ロファ ジに ジに ジに occurrence させると lpS-dependent <s:1> IL-6 production が specific に reduction て て た た た た. Youdaoplaceholder0 IκBNSを is present with the に obstruction of the <s:1> cell で が and NF-κB <s:1> DNA binding energy が recognition められた. さ ら に, I kappa BNS predominate は IL - 6 プ ロ モ ー タ ー に p50NF - kappa B predominate サ ブ ユ ニ ッ ト と altogether に constant meet に し て い る こ と が ク ロ マ チ ン immune sink method の parsing か ら Ming ら か に な っ た. さ ら に, RNAi に よ る I kappa BNS predominate の ノ ッ ク ダ ウ ン マ ク ロ フ ァ ー ジ で は, LPS stimulation dependency の IL - 6 have が specific に raised and し て い た. Results above の か ら, normal colon mucosa lamina propria マ ク ロ フ ァ ー ジ に constant に 発 now し て い る I kappa BNS predominate が マ ク ロ フ ァ ー ジ cell に お い て, IL - 6 の an adverse に specific に masato and し て い る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

Yamamoto M. et al.: "Role of Adaptor TRIF in the MyD88-Independent Toll-Like Receptor Signaling Pathway."Science. 301. 640-643 (2003)

Yamamoto M.等人：“适配器 TRIF 在 MyD88 独立 Toll 样受体信号通路中的作用。”科学。

Yamamoto, M., et al.: "TRAM is specifically involved in the TLR4-mediated MyD88-independent signaling pathway."Nat.Immunol.. 4. 1144-1150 (2003)

Yamamoto, M., et al.：“TRAM 特别参与 TLR4 介导的 MyD88 独立信号通路。”Nat.Immunol.. 4. 1144-1150 (2003)

The roles of two IkB kinase-related kinases in lipopolysaccharide and double stranded RNA signaling and viral infection.

两种 IkB 激酶相关激酶在脂多糖和双链 RNA 信号传导以及病毒感染中的作用。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Exp. Med 199
• 作者: S.S.Diebold;T.Kaisho 他;H.Hemm 他
• 通讯作者: H.Hemm 他

Hokuto, I.et al.: "Stat-3 is required for pulmonary homeostasis during hyperoxia."J.Clin.Invest.. 113. 28-37 (2003)

Hokuto, I.et al.：“高氧期间肺稳态需要 Stat-3。”J.Clin.Invest.. 113. 28-37 (2003)