類鼻疽菌の宿主細胞感染に関与する宿主分子の同定と解析

类鼻疽杆菌感染宿主细胞相关宿主分子的鉴定与分析

• 批准号: 08F08799
• 负责人: 竹田 潔
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Osaka University (2009)The University of Tokyo (2008)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08F08799/
• 关键词: 感染症; 人獣感染症; II型分泌装置; 毒性因子; III型分泌装置

類鼻疽菌は、東南アジアやオーストラリア北部などの熱帯・亜熱帯地域で類鼻疽と呼ばれる感染症を引き起こすグラム陰性桿菌である。類鼻疽菌はIII型分泌装置を有しているが、感染症発症のメカニズムは不明である。本研究では、類鼻疽菌のIII型分泌装置により分泌される分子が会合する宿主分子を、酵母ツーハイブリッド法を用いて明らかにし、その感染成立、毒性発揮のメカニズムを解明することを目的とし解析した。類鼻疽菌のいくつかのIII型分泌装置に関わる遺伝子をベイトとして酵母ツーハイブリッドを行った。その結果、BopAをベイトとしたスクリーニングで、integrin-linked kinase(ILK)遺伝子を単離した。293細胞を用いた免疫沈降法の解析から、BopAとILKが宿主細胞内で会合することを確認した。また、両分子の種々の変異体を用いた解析から、ILKのキナーゼドメイン(193-452アミノ酸)とBopAのRho GTPase inactivation domain(RID)ドメインのC末端(300-326アミノ酸)が会合に必要なことが明らかになった。ILKはfocal adhesion(接着班)や細胞接着に深く関与していることが知られているので、HeLa細胞にBopAを発現させ、BopAの細胞内局在、細胞接着への影響を解析した。BopAを発現したHeLa細胞は、細胞蒔種後4時間までの培養皿への接着が有意に遅れていた。しかしながら、20時間後には、細胞はほぼ正常に接着していた。また、BopAは20時間後にはpaxilinやvinculinなどの接着班関連分子との共局在も見られなかった。この結果から、BopAは、接着班や細胞接着などのILKに関与した機能には、あまり関与していないことが示唆された。

Melioidosis in the southeast, north, and south regions of the country is a major cause of infection. Malleiform bacteria have type III secretory apparatus, infection symptoms, unknown. The purpose of this study was to elucidate the molecular association between the secretory apparatus of type III of P. pseudomallei and host molecules, and the use of yeast cell culture methods to elucidate the establishment of infection and the development of virulence. Malleiform bacteria are closely related to type III secretory apparatus. Results: BopA, integrin-linked kinase(ILK), etc. 293 cells were analyzed by immunoprecipitation method, and BopA and ILK were confirmed to meet in host cells. The C-terminal (300-326) of the Rho GTase inactivation domain(RID) of BopA and the C-terminal (193-452) of the ILK molecule are combined. ILK focal adhesion, cellular adhesion, BopA development, cellular localization and cellular adhesion were analyzed. BopA was detected in HeLa cells, and 4 hours after cell seeding, the culture dishes were then intentionally incubated. After 20 hours, the cells returned to normal. After 20 hours, the paxilin and vinculin molecules of the next shift were found in the whole game. The result of this is that the BopA is the next cell and the ILK is the next function.

项目成果

A single polymorphic amino acid on Toxoplasma gondii kinase ROP16 determines the direct and strain-specific activation of Stat3.

• DOI: 10.1084/jem.20091703
• 发表时间: 2009-11-23
• 期刊: The Journal of experimental medicine
• 作者: Yamamoto M;Standley DM;Takashima S;Saiga H;Okuyama M;Kayama H;Kubo E;Ito H;Takaura M;Matsuda T;Soldati-Favre D;Takeda K
• 通讯作者: Takeda K

Class-specific regulation of pro-inflammatory genes by MyD88 pathways and IκBζ

• DOI: 10.1074/jbc.m709965200
• 发表时间: 2008-05-02
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Kayama, Hisako;Ramirez-Carrozzi, Vladimir R.;Takeda, Kiyoshi
• 通讯作者: Takeda, Kiyoshi

ATP drives lamina propria TH17 cell differentiation

• DOI: 10.1038/nature07240
• 发表时间: 2008-10-09
• 期刊: NATURE
• 影响因子: 64.8
• 作者: Atarashi, Koji;Nishimura, Junichi;Takeda, Kiyoshi
• 通讯作者: Takeda, Kiyoshi

Innate immune responses at the intestinal mucosa

肠粘膜的先天免疫反应

• 发表时间: 2010
• 作者: Hongyu Zhang. Takashi Karasawa;Hiroshi Yamada;Shigehiro Yamaguchi;Kiyoshi Takeda
• 通讯作者: Kiyoshi Takeda

Commensal bacteria-derived ATP mediates Th17 cell development in theintestinal lamina propria

共生细菌衍生的 ATP 介导肠固有层 Th17 细胞发育

• 发表时间: 2008
• 作者: 田所優子;西村栄美;鈴木宏一郎;Writing Committee for the Normal Tension Glaucoma Genetic Study Group of Japan Glaucoma Society;竹田 潔
• 通讯作者: 竹田 潔