骨格筋脱分極誘発性Ca2+遊離におけるリアノジン受容体アイソフォームの機能解析

兰尼碱受体亚型在骨骼肌去极化诱导 Ca2+ 释放中的功能分析

• 批准号: 15700307
• 负责人: 樫山 拓
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15700307/
• 关键词: 興奮収縮連関; リアノジン受容体; Ca2+ induced Ca2+ release; プロカイン; ジヒドロピリジン受容体; 骨格筋; Ca^<2+>イメージング

骨格筋の興奮収縮連関における細胞内Ca^<2+>の上昇(DICR)は、脱分極により引き起こされる電位依存性Ca^<2+>チャネルの構造変化が、筋小胞体膜上のCa^<2+>遊離チャネル/リアノジン受容体(RyR)に伝達されることによると考えられている(メカニカルカップリング)。一方、Ca^<2+>がRyRに直接リガンドとして働きCa^<2+>遊離を起こす機構(CICR)も存在するが、これが筋収縮においてどのような役割を果たしているかについては議論が残る。カエル骨格筋にはメカニカルカップリング能とCICR活性の両方を持つαRyRとCICR活性のみを持つと考えられているβRyRがほぼ等量発現している。本研究ではDHPRとカップリングしたαRyRから遊離されるCa^<2+>がカップリングしていないαRyRやβRyRによって増幅される可能性について検討した。αRyR、βRyRをRyR欠損myotubeに発現させ、脱分極刺激を与えた際の細胞内Ca^<2+>濃度変化を測定した。αRyRは脱分極刺激によるDICR活性とCaffeineにより促進されるCICR活性の両方を示した。βRyRはCICR活性を示したがDICR活性は示さなかった。プロカインによりαRyR,βRyR共にCICRは有意に抑制された。このCICR活性を抑制した条件化において脱分極刺激を与えたところCa2+遊離量はαRyR単独、またαRyR+βRyR共発現の細胞においても有意な差は認められなかった。したがって、DICRにおけるCICRの寄与はαRyRに由来する物もβRyRに由来する物もごく僅かであることが推察された。また、カフェインによるCa^<2+>上昇の様子がαRyRとβRyRとで時空間的に異なるという興味深い特徴も見いだされた。この結果については、米・ロングビーチで開かれた第49回Biophysical Societyと第78回日本薬理学会において発表した。

Skeletal muscle の excited 収 shrink even masato に お け る intracellular Ca ^ 2 + < > の rise (DICR) は, polarization に よ り lead き up こ さ れ る potential dependency Ca ^ 2 + < > チ ャ ネ ル の structure - が, small cell body muscle membrane の Ca ^ 2 + < > free チ ャ ネ ル / リ ア ノ ジ ン by let body (RyR) に 伝 da さ れ る こ と に よ る と exam え ら Youdaoplaceholder0 れて る(メカニカ カップリ カップリ カップリ グ グ). One party, the Ca ^ 2 + > < が RyR に directly リ ガ ン ド と し て 働 き Ca ^ 2 + > < free を up こ す institutions (CICR) も す る が, こ れ が reinforcement 収 shrinkage に お い て ど の よ う な "を cut fruit た し て い る か に つ い て は comment が る residue. カ エ ル skeletal muscle に は メ カ ニ カ ル カ ッ プ リ ン グ can と CICR active の struck party を hold つ alpha RyR と CICR active の み を hold つ と exam え ら れ て い る beta RyR が ほ ぼ equivalent 発 now し て い る. This study で は DHPR と カ ッ プ リ ン グ し た alpha RyR か ら free さ れ る Ca ^ 2 + > < が カ ッ プ リ ン グ し て い な い alpha RyR や beta RyR に よ っ て rights of さ れ る possibility に つ い て beg し 検 た. αRyR, βRyRをRyR underdamage myotubeに occurrence させ depolarized stimulation を and えた <s:1> determination of intracellular Ca^<2+> concentration variation を た. Alpha RyR は points off very stimulating に よ る DICR active と Caffeine に よ り promote さ れ る CICR active の struck party を shown し た. βRyR たが CICR activity を indicates たが たがDICR activity indicates さな った った. Youdaoplaceholder0, プロカ, によ,, αRyR,βRyR co-に, CICR によ intentionally に inhibit された. こ の CICR inhibition し を た conditional に お い て points off extremely stimulation を with え た と こ ろ Ca2 + free volume は alpha RyR 単 alone, ま た alpha RyR + beta RyR total 発 is の cells に お い て も intentionally な poor は recognize め ら れ な か っ た. し た が っ て, DICR に お け る CICR の send は alpha RyR に origin す る content も beta RyR に origin す る content も ご く only か で あ る こ と が push examine さ れ た. ま た, カ フ ェ イ ン に よ る Ca ^ 2 + < > rise の others child が alpha RyR と beta RyR と で に space when different な る と い interests deep い う, 徴 も see い だ さ れ た. こ の results に つ い て は, m. ロ ン グ ビ ー チ で open か れ た 49th back Biophysical Society と 78 back to Japan 薬 motivation to learn に お い て 発 table し た.

项目成果

Minor contribution of CICR to Ca2+ release upon depolarization of 1B5 myotubes expressing frog ryanodine receptors

CICR 对表达青蛙兰尼碱受体的 1B5 肌管去极化后 Ca2+ 释放的微小贡献

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biophysical Journal 88
• 作者: Kashiyama T;Murayama T;Allen PD;Ogawa Y
• 通讯作者: Ogawa Y

Depolarization induced Ca2+ release (DICR) involves minor CICR in 1B5 myotubes expressing frog ryanodine receptors

去极化诱导的 Ca2 释放 (DICR) 涉及表达青蛙兰尼碱受体的 1B5 肌管中的轻微 CICR

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences 97
• 作者: Kashiyama T;Murayama T;Allen PD;Ogawa Y
• 通讯作者: Ogawa Y