Oct-3/4およびRex-1遺伝子発現を指標とした成体多能性幹細胞の局在観察

以Oct-3/4和Rex-1基因表达为指标的成体多能干细胞定位观察

• 批准号: 16770177
• 负责人: 豊岡 やよい
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16770177/
• 关键词: 成体幹細胞; ES細胞; Oct-3; 4遺伝子; MAPC; 4; Rex-1; 成体多能性幹細胞

マウス成体においてES細胞のように多分化能を持つ万能幹細胞が存在するのかどうかを検討する目的で、胎仔期の未分化細胞に特異的に発現するOct-3/4およびRex-1遺伝子を発現する細胞が成体組織内に存在するか否かを調べる試みを行った。Oct-3/4遺伝子座に蛍光タンパク質であるEGFPの遺伝子を組み換え挿入したマウスの主要な臓器において、EGFP陽性細胞をFACSにより観察した結果、EGFP陽性細胞は精巣以外の臓器には全く認められなかった。この結果から、Verfaillieらの樹立した成体幹細胞(MAPC ; Jiang et al.,Nature. 2002)は、体性幹細胞等の比較的未分化な体細胞が脱分化してOct-3/4を発現する細胞へと形質転換した結果現れた、ある培養条件下でのみ出現可能な細胞であると結論付けられる。我々は引き続きRex-1遺伝子座にEGFP遺伝子を挿入したES細胞を樹立し、組織内に存在するRex-1の発現細胞を検出出来るマウスの作成を目指した。Rex-1遺伝子座組み替えES細胞でのキメラ形成は成功したものの、残念ながらgerm line transmissionが起こらず、Rex-1遺伝子発現をレポーティング出来るマウス系統の作成には至らなかった。またVerfaillieらの発表した方法に従い、マウス骨髄細胞からのMAPCの樹立を試みたが成功しなかった。彼女らの方法に従ってマウスMAPCを樹立出来たという研究室は今のところ無く、公開されている情報だけで他の研究室でMAPCの樹立を再現することは不可能なのではと推測される。

マ ウ ス adult に お い て ES cells の よ う に つ universal stem cells が existence much differentiation can を す る の か ど う か を beg す 検 る purpose で, tire seed stage の undifferentiated cells に specific に 発 now す る Oct - 3/4 お よ び Rex - 1 heritage 伝 son を 発 now す る cells が adult tissues に exist す る か no か を adjustable べ る try み を line っ た. Oct - 3/4 heritage 伝 stroma に 蛍 light タ ン パ ク qualitative で あ る EGFP の posthumous son 伝 み を group in え scions into し た マ ウ ス の な main viscera に お い を て, EGFP positive cells both FACS に よ り 観 examine し た results, EGFP positive cells は 巣 の viscera beyond に は く all recognize め ら れ な か っ た. <s:1> <s:1> results: ら ら, Verfaillieら <e:1> establish た adult stem cells (MAPC; は Jiang et al., Nature. 2002), body stem cells の comparison of undifferentiated な somatic が dedifferentiation し て Oct - 3/4 を 発 now す る cells へ と form quality planning in し た results now れ た, あ る cultivation conditions で の み may appear な cells で あ る と conclusion pay け ら れ る. I 々 は lead き 続 き Rex - 1 heritage 伝 stroma に EGFP heritage 伝 son を scions into し た を ES cells establish し に exists, the organization す る Rex - 1 の 発 now cells を 検 out out る マ ウ ス の made を refers し た. Rex - 1 heritage 伝 み stroma group for え ES cells で の キ メ ラ form は successful し た も の の, residual な が ら germ line transmission が up こ ら ず, Rex - 1 but 伝 発 now を レ ポ ー テ ィ ン グ out る マ ウ の ス system made に は to ら な か っ た. ま た Verfaillie ら の 発 table し た method に 従 い, マ ウ ス bone marrow cells か ら の MAPC の set を try み た が successful し な か っ た. He female ら の way に 従 っ て マ ウ ス MAPC を set out た と い う laboratory は today の と こ ろ く, publicly さ れ て い る intelligence だ け で he の laboratory で MAPC の set を reappearance す る こ と は impossible な の で は と speculation さ れ る.

项目成果

An efficient system to establish multiple embryonic stem cell lines carrying an inducible expression unit.

• DOI: 10.1093/nar/gni043
• 发表时间: 2005-03-01
• 期刊: Nucleic acids research
• 影响因子: 14.9
• 作者: Masui S;Shimosato D;Toyooka Y;Yagi R;Takahashi K;Niwa H
• 通讯作者: Niwa H