Regulation und Funktion der Telomerase in Endothelzellen

内皮细胞端粒酶的调节和功能

• 批准号: 5344668
• 负责人: Professorin Dr. Judith Haendeler
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Klinische Chemie und Laboratoriumsdiagnostik
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2011-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5344668?language=en
• 关键词: Regulation; und; Funktion; der; Telomerase

Die Telomerase ist entscheidend für die Erhaltung von telomerer DNA. Das für die Verlängerung der Telomere zuständige Enzym ist die katalytische Untereinheit der Telomerase, die Telomerase Reverse Transkriptase (TERT). TERT spielt eine wesentliche Rolle bei der Entstehung der replikativen Seneszenz von Endothelzellen. Die zugrundeliegenden molekularen Mechanismen für die Regulation von TERT sind jedoch weitgehend unbekannt. Erste Studien geben Hinweise darauf, dass TERT möglicherweise durch Bindungsproteine und/oder Phosphorylierung reguliert wird. Daher ist es Ziel dieses Antrages die Regulation von TERT zu untersuchen. TERT weist in seiner Proteinsequenz verschiedene putative Phosphorylierungsmotive für Proteinkinasen auf. Dazu zählen die Mitogen-aktivierten Protein Kinasen (MAPK), die Protein Kinase C (PKC) und Akt sowie die Tyrosinkinasen c-Abl und Src. Daher soll zunächst untersucht werden, ob TERT für seine Aktivierung phosphoryliert wird und welche Kinase/n daran beteiligt ist/sind. Nach Identifikation der Kinase sollen dann phosphomimetische und nicht mehr phosphorylierbare Mutanten von TERT hergestellt werden, um die Relevanz der Phosphorylierung für die TERT Aktivität zu untermauern und zudem zu untersuchen, ob die Phosphorylierung von TERT eine Rolle bei der Multi-Protein Komplex Bildung spielt. Da erste Hinweise zeigen, dass TERT nicht nur im Kern, sondern auch im Cytosol sowie in den Mitochondrien vorliegt, soll außerdem untersucht werden, welche Rolle die Phosphorylierung und die Multi-Protein Komplex-Bildung für die Translokation von TERT spielen. Im zweiten Teil des Antrages soll die pathophysiologische Bedeutung der Telomerase aufgeklärt werden. Oxidiertes LDL und TNFa induzieren Apoptose in Endothelzellen, dabei werden sowohl Akt als auch ERK1/2 dephosphoryliert. Daher soll untersucht werden, ob die Phosphorylierung von TERT eine Rolle in der Apoptosesignaltransduktion spielt. Im letzten Teil soll die Relevanz der Befunde in vivo untersucht werden. Daher soll die TERT Expression und Aktivität in Endothelzellen von jungen und alten Mäusen verglichen werden. Zudem soll die Rolle des oxidativen Stresses auf die TERT aktivität und den Alterungsprozeß in vivo untersucht werden. Dafür soll die TERT Aktivität in gp91 phox-/- Mäusen, die durch eine erniedrigte Freisetzung von reaktiven Sauerstoffradikalspezies im Gefäß gekennzeichnet sind, mit wild type Mäusen verglichen werden.

端粒酶是端粒DNA的一个重要组成部分。Das für die Verlängerung der Telomere suständige Enzyme ist die katalytische Unterienumerator der Telomerase，die Telomerase Reverse Transkriptase（TERT）. TERT提供了一种用于内皮细胞复制的药物。对调节TERT的分子机制的研究是不明确的。首先，通过结合蛋白和/或磷酸化调节TERT的表达。Daher is Ziel dieses Antrages die Regulation von TERT zu untersuchen. TERT在seiner Proteinsequenz中验证了推定的磷酸化蛋白激酶活性。本文介绍了丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）、蛋白激酶C（PKC）和Akt的酪氨酸激酶c-Abl和Src。Daher soll zunächst untersucht韦尔登，ob TERT für seine Aktivierung phosphorylert wird and welche Kinase/n daran beteiligt ist/sind.通过对磷酸化激酶的鉴定，发现磷酸化酶与TERT的活性之间存在着密切的关系，而不是韦尔登的梅尔突变，从而揭示了磷酸化酶在多蛋白复合体培养中的作用。首先，由于TERT不仅存在于克恩，也存在于线粒体的胞质中，因此，我们必须了解韦尔登的磷酸化作用和多蛋白复合体对TERT转录的影响。两种肿瘤的发病机制与端粒酶的病理生理学基础有关，但端粒酶的作用与韦尔登有关。氧化LDL和TNF α诱导内皮细胞凋亡，韦尔登细胞Akt也可使ERK 1/2去磷酸化。因此韦尔登的磷酸化在凋亡信号转导中起着重要作用。我让你在韦尔登的生命中找到幸福的相关性。Daher soll die TERT Expression und Aktivität in Endothelzellen von jungen und阿尔滕Mäusen verglichen韦尔登.因此，氧化应激对体内TERT活化和转化的影响可韦尔登。Dafür soll die TERT Aktivität in gp91 phox-/- Mäusen，die durch eine erniedrigte Freisetzung von reaktiven Sauerstoffradikalspezies im Gefäueckennzeichnet sind，mit wild type Mäusen verglichen韦尔登.