インフルエンザ脳症の疾患感受性遺伝子群の同定

流感脑病易感基因的鉴定

• 批准号: 16790580
• 负责人: 山田 博司
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790580/
• 关键词: ウイルス; インフルエンザ; 脳症; CPT2; VDAC; インフルエンザ感染; インフルエンザ脳症; ミトコンドリア機能障害; プロテアーゼ

インフルエンザウイルス感染は、特に小児において、しばしば重篤化し、脳症を発症して死に至らしめることがある。また、脳症を発症すると後遺症の残ることが多く、現在の日本の少子化社会において、国民に大きな不安を引き起こしており、発症機序の解明と治療法の確立が強く望まれている。これまでに当研究室で取り扱った42症例のインフルエンザ脳症の検体から、ミトコンドリアの脂肪酸代謝障害を示す症例が高頻度に検出されており、本研究では、さらに、100近くのインフルエンザ脳症の検体から、同意を得て、ゲノムDNAを抽出し、ミトコンドリアの脂肪酸代謝に関わるcarnitine palmitoyltransferase2(CPT2)およびβ-酸化に関わる酵素複合体のプロモーター領域と蛋白質をコードする領域の塩基配列を網羅的に解析した。その結果、CPT2をコードする領域において、以前に見つけた遺伝子変異(スニップ)に加えて、新たに数種類のスニップを発見した。これらのスニップを持つCPT2発現プラスミドを作製し、細胞にトランスフェクトして、活性を測定すると、wild-typeのものより、有意に活性が低下していた。また、この変異CPT2発現細胞では、β-酸化の低下も見られ、これらのCPT2遺伝子のスニップは、インフルエンザ脳症の危険因子であると考えられる。現在、恒常的にこれらの変異CPT2を発現する細胞を作製中であり、それらの細胞を用いて、インフルエンザウイルス感染、鎮痛解熱剤に対する細胞膜透過性の変化を検討する予定である。次に、インフルエンザ脳症において発現が増加するvoltage-dependent anion channel(VDAC)-1,2,3を恒常的に発現する細胞を作製した。現在、これらの細胞を用いて、インフルエンザウイルス感染、鎮痛解熱剤投与におけるVDACの発現変化を高感度に検出できるシステムを作製中である。また、変異CPT2を発現するマウスを作製するために、CPT2遺伝子をノックアウトした細胞を作製中である。

イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル は ス infection, に small where に お い て, し ば し ば heavy Benedict し, 脳 disease を 発 disease し て に to death ら し め る こ と が あ る. ま た, 脳 を 発 disease す る と sequela の residual る こ と が く, now の の the country society に お い て, large national に き な uneasy を lead き up こ し て お り, 発 machine sequence の interpret の と therapy to establish strong が く hope ま れ て い る. こ れ ま で に when laboratory で り Cha っ た 42 cases の イ ン フ ル エ ン ザ 脳 disease の 検 body か ら, ミ ト コ ン ド リ ア の fatty acid metabolism handicap of を cases shown す が high frequency に 検 out さ れ て お り, this study で は, さ ら に, nearly 100 く の イ ン フ ル エ ン ザ 脳 disease の 検 body か ら, consent を て, ゲ ノ ム を DNA extraction し, ミ ト コ ン Fatty acid metabolism in ド リ ア の に masato わ る carnitine palmitoyltransferase2 (CPT2) お よ び beta acidification に masato わ る enzyme complex の プ ロ モ ー タ ー field と protein を コ ー ド す る field の salt base with column を snare に parsing し た. そ の results, CPT2 を コ ー ド す る field に お い て, previously に つ け た heritage 伝 sub - vision (ス ニ ッ プ) に plus え て, new た に several kinds の ス ニ ッ プ を 発 see し た. こ れ ら の ス ニ ッ プ を hold つ CPT2 発 now プ ラ ス ミ ド を cropping し, cell に ト ラ ン ス フ ェ ク ト し て, determination of active を す る と, wild -type の も の よ り, intentionally に active low が し て い た. ま た, こ の - different CPT2 発 now cells で は, low beta acidification の も ら れ, こ れ ら の CPT2 posthumous son 伝 の ス ニ ッ プ は, イ ン フ ル エ ン ザ 脳 disease の 険 danger factor で あ る と exam え ら れ る. Now, constant に こ れ ら の - different CPT2 を 発 now す る cells in the を cropping で あ り, そ れ ら の cells を using い て, イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス infection and analgesic antipyretic tonic に す seaborne る cell membrane permeability の variations change を beg す 検 る designated で あ る. に, イ ン フ ル エ ン ザ 脳 disease に お い て 発 now が raised す る voltage - dependent anion channel (VDAC) - 1, 2, 3 を constant に 発 now す る cells を cropping し た. Now, こ れ ら の cells を using い て, イ ン フ ル エ ン ザ ウ イ ル ス infection and analgesic antipyretic tonic cast with に お け る VDAC の 発 now - the を Gao Gan degrees に 検 out で き る シ ス テ ム を cropping systems in で あ る. ま た, - different CPT2 を 発 now す る マ ウ ス を cropping す る た め に, CPT2 but 伝 を ノ ッ ク ア ウ ト し た cells in the を cropping で あ る.

项目成果

Identification of trypsin I as a candidate for influenza A virus and Sendai virus glycoprotein processing protease in rat brain

大鼠脑内甲型流感病毒候选胰蛋白酶 I 和仙台病毒糖蛋白加工蛋白酶的鉴定

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biological Chemistry (in press)
• 作者: Akira Kikuchi;et al.;山本 英樹 他2名;Hiroshi Kido et al.;Dengfu Yao et al.;Yuushi Okumura et al.;奥村裕司;木戸 博;Trang Quang Le et al.
• 通讯作者: Trang Quang Le et al.