軸索に濃縮する新規分子p57が神経細胞の極性を制御する分子メカニズムの解明

阐明p57（一种集中在轴突中的新型分子）控制神经元极性的分子机制

• 批准号: 05J02807
• 负责人: 森 達也
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nara Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J02807/
• 关键词: 神経細胞; 神経極性; 軸索; 樹状突起; p57; PI 3-kinase; RUNドメイン; 極性形成; Singar; PI 3-Kinase; RUN domain

本年度はp57の相互作用分子として昨年度同定したPI 3-kinaseとの作用機構を解析し、PI 3-kinaseシグナリングを介した神経極性形成に対するp57の作用の解明を目指した。(1)p57とPI 3-kinaseの相互作用様式の解明p57とPI 3-kinaseの相互作用に必須な領域をp57のドメイン欠失変異体を用いた免疫沈降法により解析した。その結果、p57はRUNドメインを含むN末領域によりPI 3-kinaseと相互作用することを明らかにした。また、免疫沈降法を用いた解析から、p57はPI 3-kinaseの触媒サブユニットであるp110α、および調節サブユニットであるp85αの両方と相互作用することを明らかにした。また、精製タンパク質を用いたin vitroの結合実験では相互作用が確認できなかったことから、p57は他の分子を介してPI 3-kinaseと相互作用することが示唆された。(2)PI 3-kinaseシグナリングにおけるp57の機能解析p57のPI 3-kinase活性に対する影響をin vitroおよびin vivoにおいて解析した。その結果、PI 3-kinaseの下流の因子の活性化状態および、PI 3-kinaseのin vitroにおける活性に対しての効果は認められなかった。しかしながら、PI 3-kinaseの阻害剤であるLY294002を神経細胞に添加した結果、p57のsiRNAにより誘導される過剰軸索の形成を有意に抑制した。一方、恒常活性化型PI 3-kinaseが誘導する過剰軸索の形成に対してはp57の発現抑制は影響を与えなかった。以上の結果、p57はPI 3-kinaseの上流において間接的に下流シグナルを修飾し、強固な神経極性形成を保証していることが示唆された。

This year, the interaction mechanism of PI 3-kinase was analyzed and the role of PI 3-kinase in the formation of p57 was clarified. (1)p57 and PI 3-kinase interaction formula to understand the interaction between p57 and PI 3-kinase must be in the field of p57 and the lack of foreign protein to use immune precipitation method to analyze. P57 is the most common form of protein in the human body. p110α, p85α and p87 α are the catalytic and regulatory components of PI 3-kinase. P57 is a molecular mediator of PI 3-kinase interaction. (2)PI p57 PI 3-kinase activity in vitro and in vivo The results show that the activation state of PI 3-kinase downstream factors is too high, and the activity of PI 3-kinase in vitro is too high. The PI3-kinase inhibitor LY294002 intentionally inhibits axonal formation as a result of p57 siRNA addition to neurons. The expression of p57 was inhibited by PI 3-kinase, which was induced by PI 3-kinase. The above results indicate that p57 can modify the upstream and downstream of PI 3-kinase and ensure the formation of strong polarity.

项目成果

Singar の発現または機能の抑制による神経軸索の形成・伸長と神経再生への応用

通过抑制Singar的表达或功能在神经轴突的形成和伸长以及神经再生中的应用

• 发表时间: 2012

Singarの発現または機能抑制による神経軸索の形成・伸長と神経再生への応用

通过Singar的表达或功能抑制神经轴突的形成和伸长及其在神经再生中的应用

• 发表时间: 2005