神経極性を形づくる微小管重合を制御する神経ステロイド

控制塑造神经元极性的微管聚合的神经类固醇

• 批准号: 17049023
• 负责人: 植田 弘師
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17049023/
• 关键词: ストレス性精神疾患; 神経ステロイド; ナノメディシン; HPA axis; グルココルチコイド; WGA; MAP2; tubulin; 微小管制御ナノシステム; 樹状突起; X線結晶化構造解析; FRAP; QCM法

神経細胞は樹状突起と軸索という機能的に分化した突起を有し、神経間情報交換のため常にシナプス形成と樹状突起可変動を繰り返している。特に樹状突起は情報伝達の入力を司り、その可変動は微小管のダイナミックな変化とそれを制御するmicrotubule associated protein 2(MAP2)の働きに起因している。我々は神経内において産生される神経ステロイドの一群が、MAP2に作用することで樹状突起における微小管ダイナミクスを変化させるナノシステムの存在を見いだし、その全容解明を行ってきた。本年度は神経ステロイドによるMAP2を介した微小管ダイナミクスの解析を細胞レベル及び、再構成系において解明した。細胞レベルにおける検討では、培養海馬神経細胞への蛍光タンパク質融合微小管(AcGFP-tubulin)発現ベクターの導入により細胞でのtubulin動態を可視化し、FRAP法を用いたライブイメージングにより解析した。通常、tubulinは自発的に重合を行うが、神経ステロイド・プレグネノロン(PREG)を処置する事で、処置直後から1.8倍の重合速度に上昇し、24時間後には、樹状突起の著しい伸張を誘導していた。一方、コルチコステロン(Cort)は、FRAP解析の結果、Tubulin重合速度を0.41倍に低下させ、24時間後における樹状突起を著しく退縮させる作用を有することが示された。このPREG及びCortによる効果は、単独では樹状突起伸展に影響しないプロゲステロン(PROG)によって拮抗される事が明らかになった(PREG+PROG:1.8→1.1倍、Cort+PROG:0.41→1.2倍)。一方、再構成系における検討では、分子間相互作用定量水晶発振子(QCM)法により、神経ステロイドがMAP2に結合部位を有し、PROG処置での拮抗作用も、PREG及びCortと同部位を競合し合うことを、キネティクス解析の結果明らかとした。さらに、暗視野顕微鏡下におけるtubulin重合は、細胞を用いたFRAP解析と同様に、PREG処置において重合速度の上昇が認められ、一方のCort処置では、重合速度の減少が認められた。また、本検討によって、Cortはtubulin重合速度を低下させるものの、すでに重合したtubulinの複合体を分解していくことはないことも明らかになった。

The differentiation of the brain, the protuberance of the brain, the protuberance of the mechanism, the protuberance of the brain, the differentiation of the brain, the protuberance of the brain, the differentiation of the brain, the protuberance of the brain, the protuberance of the brain The special protuberance is very sensitive to the microtubule system, and the microtubule system can be used to control the microtubule associated protein 2 (MAP2) system. I am concerned about the presence of microtubules, tubules, tubules and tubules. This year, we will introduce the microtubule, the MAP2, the microtubule, the microtubule and the microtubule. The microtubules were fused with microtubules (AcGFP-tubulin) in the presence of microtubule (AcGFP-tubulin). The tubulin dynamic status of the cells was changed, and the FRAP method was used. In general, the tubulin self-operated coincident line is used, the PREG is used to control the incident, the rear position is 1.8 times the coincidence speed, and the 24-hour rear alarm is used to extend the lead time of the device. On the one hand, the Cort test, the FRAP analysis results, the Tubulin coincidence rate 0.41 times lower than the normal, and the 24-hour postmortem spike had a significant effect on the withdrawal effect. The PREG, Cort, and solitary protuberances were stretched in the shape of an outspread (PROG) to antagonize the disease (PREG+PROG:1.8 1.1x, Cort+PROG:0.41 1.2x). On the one hand, the molecular interaction quantitative crystal oscillator (QCM) method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator (QCM) method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator (QCM) method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator (QCM) method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator (QCM) method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator method, the intermolecular interaction quantitative crystal oscillator method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator method, the molecular interaction quantitative crystal oscillator method and the molecular interaction quantitative crystal oscillator method were used. The tubulin coincident, the FRAP parsing, the PREG setting, the Cort setting, the coincident speed, and the coincident speed. The coincident speed of Cort tubulin is low, the coincident speed is low, and the complex of tubulin is decomposed.

项目成果

Endocrine disrupting chemical atrazine causes degranulation through Gq/11 protein-coupled neurosteroid receptor in mast cells

• DOI: 10.1093/toxsci/kfj087
• 发表时间: 2006-04-01
• 期刊: TOXICOLOGICAL SCIENCES
• 影响因子: 3.8
• 作者: Mizota, K;Ueda, H
• 通讯作者: Ueda, H