低酸素性肺高血圧マウスにおける肺循環リモデリングの検討

缺氧性肺动脉高压小鼠肺循环重塑的检测

• 批准号: 17790529
• 负责人: 水野 史朗
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790529/
• 关键词: p53; 低酸素; 肺高血圧

1.低酸素暴露マウスの肺組織におけるp53、CDK inhibitorの検討約10%酸素濃度の環境下でp53KOマウスを8週間飼育後、全肺組織を摘出しreal-time RT-PCRとWestern blot法によるp53、p21、p27のmRNA、蛋白発現を検討した。野生型マウスでは低酸素によりp53の蛋白発現は亢進し、p21の転写活性と蛋白発現が亢進、p27はmRNA、蛋白いずれも有意な変化は認められなかった。KOマウスにおいては野生型で認められたp21の低酸素による誘導は認められず、p27も有意な変化は認められなかった。肺血管局所での同遺伝子の発現を検討するため、同様に低酸素に8週間暴露したマウスを、気管より5%sucrose加OCTコンパウンドを注入後に瞬間凍結、新鮮凍結切片を作成し、組織学的に50〜100μmの肺微細血管をLaser-capture micro dissection法を用いて抽出しmRNAの発現を検討、全肺組織と同様にP53ノックアウトマウスにおいて、野生型に比し低酸素暴露によるp21の発現が抑制されていた。2.肺血管細胞における低酸素下でのp53、CDKinhibitorp21、p27の発現の検討低酸素環境下におけるヒト肺動脈平滑筋、ヒト肺線維芽細胞のp53、p21、p27のsiRNAによる遺伝子抑制を用いたBrdUの取り込みによる細胞増殖を検討した。いずれの遺伝子抑制によってもコントロール群に比して、細胞増殖は亢進したが、2%の中等度の低酸素下においてはp27の遺伝子抑制が、0.1%の高度の低酸素下においてはp53、p21の遺伝子抑制により細胞増殖が有意に上昇した。結語.低酸素における肺血管リモデリングにはp53がp21を介して抑制的に作用しており、p27は中等度の低酸素下において重要な役割を持つと考えられた。

After 8 weeks of low-acid-level exposure <s:1> ウス <s:1> lung tissue におけるp53 and CDK inhibitor <s:1> 検 in an environment with approximately 10% acid-level concentration <e:1> でp53KO ウスを ウスを, <s:1> real-time RT-PCRとWestern blotting was extracted from the whole lung tissue を blot method によるp53, p21, p27 <s:1> mRNA and protein occurrence を検 to investigate た. Wild type マ ウ ス で は low acid element に よ り p53 protein の 発 now は hyperthyroidism し, p21 の と protein 発 が hyperthyroidism, now planning to write activity p27 は mRNA, protein い ず れ も intentionally な variations change は recognize め ら れ な か っ た. KO マ ウ ス に お い て は wild-type で recognize め ら れ た p21 の low acid element に よ る induced は recognize め ら れ ず, p27 も intentionally な variations change は recognize め ら れ な か っ た. Pulmonary vascular bureau で の with heritage 伝 son の 発 を now beg す 検 る た め, with others in に low acid element に eight weeks between exposure し た マ ウ ス を, 気 よ り 5% sucrose and OCT コ ン パ ウ ン ド を に instantly freeze after injection, fresh frozen section を make し, histological に 50 ~ 100 microns の lung imperceptible blood-vessel を Laser - the capture を micro dissection method with い て spare し mRNA の 発 を now beg, whole lung tissue 検 と with others に P53 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス に お い て, lower than the wild type に し acid element exposed に よ る p21 の 発 now が inhibit さ れ て い た. 2. Pulmonary vascular cells に お け る で under low acid element の p53, CDKinhibitorp21, p27 の 発 is の 検 element for low acid environment に お け る ヒ ト pulmonary artery smooth muscle, ヒ ト lung line d bud cells の p53, p21 and p27 の siRNA に よ る heritage 伝 son of を resist い た BrdU の take り 込 み に よ る を cells raised colonization Youdaoplaceholder0 to claim た. い ず れ の heritage 伝 child restrain に よ っ て も コ ン ト ロ ー に ル group than し て, cell rights colonization は hyperthyroidism し た が, 2% の medium degree の に under low acid element お い て は p27 の heritage 伝 inhibit が, 0.1% の highly の に under low acid element お い て は p53, p21 の heritage 伝 child restrain に よ り cells raised colonization が intentionally に rise し た. Epilogue. Low acid element に お け る pulmonary vascular リ モ デ リ ン グ に は p53 が p21 を interface し て inhibitory effect of the に し て お り, p27 は medium degree の に under low acid element お い て cut を hold important な service つ と exam え ら れ た.