遺伝子ノックアウト動物を用いた低酸素性肺高血圧症の発症メカニズムの解明

利用基因敲除动物阐明缺氧性肺动脉高压的发病机制

• 批准号: 12770306
• 负责人: 高橋 滋
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12770306/
• 关键词: プロリルヒドロキシラーゼ; 低酸素; 肺高血圧; 転写調節; コラーゲン

今までに、細胞を低酸素状態に暴露するとProlyl 4-hydroxylase(P4H)α(I)遺伝子の転写速度が増加しP4Hα(I)mRNA量が増加することを見い出している。この現象が低酸素性高血圧症の原因の一つであるという仮説を立てた。このような低酸素によるP4Hα(I)遺伝子の転写調節機構を知る第一段階として、P4Hα(I)遺伝子の基本的転写調節機構の解明を試みた。まず、P4Hα(I)遺伝子の転写開始点より上流約1.9kbの領域をルシフェラーゼ遺伝子の上流に組み込んだプラスミドを作製した。そして、Exo nuclease処理により5'欠失変異体を作製した。これらのプラスミドをマウスの肝臓由来Hepal細胞、ラット胎児肺由来繊維芽細胞へ導入しルシフェラーゼアッセイを行った。その結果、転写開始点より上流-562〜ー117bpに両細胞での転写を促進する配列の存在を確認した。

The rate of transcription of Prolyl 4-hydroxylase(P4H)α(I)mRNA increased and the amount of P4H α(I)mRNA increased in cells exposed to hypoxia. This phenomenon is the cause of hypoacidosis and hypertension. The first step of understanding the mechanism of writing regulation of P4H α(I) gene is to try to understand the basic mechanism of writing regulation of P4H α(I) gene. The first part of the P4H α(I) gene is about 1.9kb in length. The second part of the P4H α (I) gene is about 1.9kb in length. Exo nucleotide processing is 5'short of control. The liver is derived from Hepal cells, and the fetus is derived from vascular cells. As a result, the presence of the alignment of the upstream-562 to-117 bp of the DNA start point was confirmed.

项目成果

Y.Takahashi,S.Takahashi et al: "Hypoxic Induction of Prolyl 4-Hydroxylase α(I) in cultured cells"J.Biol.Chem.. 275. 14139-14146 (2000)

Y.Takahashi、S.Takahashi 等人：“培养细胞中脯氨酰 4-羟化酶 α(I) 的缺氧诱导”J.Biol.Chem.. 275. 14139-14146 (2000)

Yashimi,T.,Takahashi,Y.,Takahashi,S. et al: "Changes in lung-specific molecular expression during differentiation of hamster embryonic M3E3/C3 cell line"Biochem.Cell Biol.. 78・. 659-666 (2000)

Yashimi，T.，Takahashi，Y.，Takahashi，S.等：“仓鼠胚胎M3E3/C3细胞系分化过程中肺特异性分子表达的变化”Biochem.Cell Biol.. 78・. ）