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病原因子としてのブタ腸管カリシウイルスの性状解明

猪肠道杯状病毒作为致病因子的特征

基本信息

批准号：
18580305
负责人：
遠矢幸伸
金额：
$ 2.55万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18580305/
关键词：
ブタカリシウイルスノロウイルスサポウイルス下痢血清調査

项目摘要

公衆衛生上重要なヒトのノロウイルス(NV)とサポウイルス(SV)に類似の新しいカリシウイルスがウシやブタにも存在することが近年明らかになりつつあり、その家畜衛生ならびに公衆衛生における意義の解明が期待されている。本研究はNVとSVを含むブタ腸管カリシウイルスを対象にして、その病原体としての性状を明らかにすることを目的とする。本年度はブタ由来NVとSVのウイルス学的性状の解析を進め、ウイルス様粒子(VLP)を作出した。さらに培養細胞での増殖も試み、以下の結果を得た。1)VLPの作出:ブタ由来NVであるK5/JP株と同SVであるK7/JP株、K8/JP株、K10/JP株並びにS20/JP株の各VP1遺伝子の組換え発現をバキュロウイルスを用いて行った。各株のVP1遺伝子由来のポリペプチドはSDS-PAGEでその発現が確認されたが、電子顕微鏡観察でVLPの形成が確認されたのではK7/JP株とK10/JP株のみであった。2)ELISA法の開発と血清調査:K7/JP株のVLPを用いて抗体検出用のELISAを開発した。某県の屠畜場で採材されたブタ血清94サンプルについて本ELISAにより血清調査を行ったところ、25サンプル(28%)が陽性を示し、K7/JP株類似のSVが日本のブタで流行している可能性が示唆された。3)培養細胞での増殖:SVで唯一細胞培養での増殖が知られているPEC/Cowden株の方法に準じ、ブタ由来株化細胞のLLC-PK1細胞にブタSVであるK10/JP株及びS20/JP株を接種し胆汁酸塩を添加した培地にて培養を行った。細胞変性効果と蛍光抗体によりその増殖を検討したが、現段階では増殖の証拠は得られていない。

Important in public healthルス(SV)にsimilar to の新しいカリシウイルスがウシやブタにもexistent することがIn recent years, らかになりつつあり, そのLivestock hygiene ならびにpublic health における meaning のclarification がexpect されている. In this study, the NV and SV contained a むブタ intestinal tube カリシウイルスを対肖にして, そのpathogen としてのcharacter を明らかにすることをpurpose とする. This year, the analysis of the characteristics of NV and SV's のウイルス science was carried out and the ウイルス様Particles (VLP) were made. We tested the proliferation of cultured cells and obtained the following results. 1) VLP production: NV であるK5/JP strain is the same as SV であるK7/JP strain, K8/JP strain, K 10/JP strain merged S20/JP strain's VP1 left 伝子の combination is replaced by え発开をバキュロウイルスを用いて行った. The origin of each strain's VP1 legacy is confirmed by SDS-PAGE, electronic The formation of VLP was confirmed by microscopic observation of K7/JP strain K10/JP strain strain. 2) ELISA method for serum investigation: K7/JP strain VLP was tested and antibodies were tested using ELISA. A certain slaughterhouse's raw materials were collected from the serum of 94 サンプルについて This ELISA was used to investigate the serum of を行ったところ, 25 There is a positive indication for the positive results of Septic (28%) and the possibility of the spread of SV similar to the K7/JP strain in Japan. 3) Propagation of cultured cells: SV's only method of cell culture and propagation of PEC/Cowden strain is accurate and accurate. The LLC-PK1 cells were inoculated with the SV K10/JP strain and the S20/JP strain and cultured with bile acid added and cultured. The cell regeneration effect is as follows: the photoantibodies are used to increase the number of cells, and the current stage is to increase the number of cells and increase the number of cells.