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脱塩基オリゴDNAを用いた表面プラズモン共鳴による一塩基多型検出

使用脱碱基寡聚 DNA 通过表面等离子共振检测单核苷酸多态性

基本信息

批准号：
06F06075
负责人：
寺前紀夫
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

遺伝的先天性疾患の診断を目的として、個々人のDNA配列を解析することの重要性が高まっている。特に、DNA配列内の一塩基多型(Single Nucleotide Polymorphisms, SNPs)検出法の開発は、個人個人に最適化された「テーラーメイド医療」の実現に向けて重要な研究課題の一つである。これまで、蛍光検出型DNAマイクロアレイが主に開発されてきたが、標的DNAへの蛍光ラベル化などの煩雑な操作が必要であることが問題とされており、これに代わる迅速、簡便かつ安価な手法の開発が期待されている。本研究では蛍光ラベル化を必要としない手法として、金電極表面に固定化した脱塩基部位含有DNA単分子膜への水素結合性小分子の結合について検討を行った。DNA単分子膜上に吸着したチトクロムcの電気化学応答を計測したところ、水素結合性小分子存在下で良好な電気化学シグナルが得られたのに対して、非存在下では電流量の減少並びに応答の鈍化が観測された。これはチトクロムc-電極間の電荷移動に対するDNA中の脱塩基部位の影響であると考えられる。また、脱塩基部位向かい側の標的塩基に対しても電流応答の依存性があることがあきらかとなった。用いた水素結合性分子であるナフチリジン誘導体と相補的な三点水素結合形成をするシトシンにおいて最も良好な応答が得られたことから、脱塩基部位への水素結合性分子の結合ならびに脱塩基部位向かい側の標的塩基の識別をチトクロムcをレポータ分子として読み出すことに成功した。現在表面プラズモン共鳴分光法による評価について検討中である。

遺伝的先天性疾患の診断を目的として,個々人のDNA配列を解析することの重要性が高まっている.特徴，DNA配列内单核苷酸多态性（Single Nucleotide Polymorphisms，SNPs）排除法研究，是人类最大化的遗传学“基因组多态性”研究的重要方向之一。荧光增白剂，荧光增白剂型DNA荧光增白剂。本研究采用荧光增白剂固定化必需的荧光增白剂方法制备，金纳米颗粒表面固定化荧光增白剂结合基部分脱有DNA分子膜的亲水性小分子复合荧光增白剂制备。DNA分子膜上吸附有嗜酸性粒细胞的幽门螺杆菌化学应答良好，水素结合性小分子存在下良好的幽门螺杆菌化学应答获得稳定的酶解骨架，不存在下细菌流量很少的幽门螺杆菌化学应答的酶解骨架。但是，在这种情况下，c-myc-hepatocellular carcinoma cells could be expressed as a cytokine.また、脱塩基部位向かい側の標的塩基に対しても電流応答の依存性があることがあきらかとなった。用氢化水元素复合性分子取代氢氧化钙，使氢化体相溶的氢化三氧化二氢形成的氢化物最好的选择性应答获得氢化物的氢化物，使氢氧化物的部分氢化水元素复合性分子取代氢氧化物，使氢氧化物部分向氢氧化物的部分氢化物转化，使氢氧化物的部分氢化物转化为氢氧化物的部分氢化物，使氢氧化物的部分氢化物的部分氢化物转化为氢氧化物的部分氢化物，使氢氧化物的部分氢化物转化为氢氧化物的部分氢化物。現在表面プラズモン共鳴分光法による評価について検討中である。