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生理活性物質の高選択的高感度検出用電気化学バイオセンサーの開発

生理活性物質の高選択的高感度検出用電気化学バイオセンサーの開発
开发用于高选择性和灵敏检测生理活性物质的电化学生物传感器
批准号：
07F07057
负责人：
寺前 紀夫
金额：
$1.41万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2007 至 2008
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07057/
关键词：
アプタマーアプタセンサー脱塩基含有DNA蛍光検出電気化学検出アデノシンDNASNPs蛍光

项目摘要

项目成果

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特定の標的物質に対して選択的に結合するアプタヤーはSELEX法による網羅的な解析から選別され、標的に対する高い選択性や親和性を有する特徴がある。アプタマーに、蛍光団や吸収団、電気化学活性団等をラベル化し、これを利用した基質特異的分析法が開発されている。本研究では脱塩基部位含有DNA二重鎖とアプタマーを組み合わせたATPのラベルフリー蛍光検出系の開発を行った。アプタマー鎖とこれに相補的な脱塩基(AP)部位含有DNA鎖からなるDNA二重鎖にナフチリジン誘導体の蛍光性リガンド(ATMND)を添加するとATMNDがAPサイトに結合し消光する。蛍光滴定実験の結果は1:1の錯生成モデルで解析でき、結合定数としてK_<11>=7.1×10^7M^<-1>を得た.この錯体にATPを添加するとアプタマー鎖とATPとの錯生成が生じ、ATMNDの蛍光が回復する。回復度にして7倍の蛍光応答を得た、蛍光の回復度によりATP存在量を分析でき、検出感度は約1μMであった。この検出感度は従来法に匹敵するか優るものであった。一方、アプタマー鎖を2分割したDNA鎖を作り、ATPとAPサイト含有DNA鎖の存在下で自己集合体が形成される系に対して、APサイト上下塩基をグアニンまたはチミンとした場合、それぞれATMNDまたはジアミノピラジン誘導体(DCPC)をリガンドとすると、消光型と発蛍光型の蛍光応答を得ることができた。ATMNDとフェロセンを結合した電気化学活性リガンドを用いた系についても検討中である。以上、脱塩基含有DNA鎖とアプタマー配列とを用いた新規分析法を開発した。
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会议论文
Label-free fluorescence detection of adenosine using an abasicsite-containing DNA
使用含无碱基 DNA 的无标记荧光检测腺苷
DOI： --
发表时间： 2008
期刊：
影响因子： --
作者： [Z. Xu, K. Morita, Y. Sato, Q. Dai., S. Nishizawa, N. Teramae]
通讯作者： N. Teramae
RNA非翻訳領域を標的とする核酸検出リガンドの創製と機能性RNA研究への応用
  • 批准号：
    22245010
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 资助金额：
    $10.48万
  • 财政年份：
    2010
  • 负责人：
    寺前 紀夫
  • 依托单位：
    Tohoku University
アプタマー含有メソポーラス材料を用いたバイオセンサーの開発
  • 批准号：
    10F00342
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.47万
  • 财政年份：
    2010
  • 负责人：
    寺前 紀夫
  • 依托单位：
    Tohoku University
脱塩基オリゴDNAを用いた表面プラズモン共鳴による一塩基多型検出
  • 批准号：
    06F06075
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.54万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    寺前 紀夫
  • 依托单位：
    Tohoku University
原始地球環境を模擬した水熱条件下でのRNA合成について
  • 批准号：
    06F06168
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.54万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    寺前 紀夫
  • 依托单位：
    Tohoku University
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