ヒト変異型μオピオイド受容体遺伝子発現モデルマウス作製による疼痛治療法の最適化

通过创建表达人类突变μ阿片受体基因的小鼠模型优化疼痛治疗方法

• 批准号: 18790109
• 负责人: 畑 春実
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790109/
• 关键词: オピオイド; ノックインマウス; テーラーメード医療; モデルマウス

進行癌患者の約70%に癌性疼痛が出現するといわれている。しかし、オピオイド感受性の個人差が大きいこと、適正使用のための基礎的エビデンスが少ないことから、有効な疼痛治療がなされていない。本研究は、疼痛との関連が指摘されているヒトの遺伝子多型(A118G)に注目し、ヒト型遺伝子多型を有するμオピオイド受容体(MOR)遺伝子発現マウスをオピオイド感受性個人差のモデルとして作製することで、個々の患者への適切なオピオイド疼痛治療法を確立させることを目的とする。H18年度にヒト変異型(A118G)μオピオイド受容体(MOR)遺伝子Knockinマウス作製用ターゲティングベクターの設計を終了しているため、今年度は、ベクターの構築作業から取り組んだ。しかし、他の研究グループによる研究発表により、当初の研究計画を変更する必要が生じた。本年度の研究実績は以下の通りである。1.Knockinマウス作製用ターゲティングベクターの再設計;昨年度は、マウスMOR遺伝子(Oprm1)exon1の開始コドンにhuman MOR cDNAを導入する方針で設計した。しかし、この方法では全てのマウス内在性Oprmvariantsの発現をknockoutすることは不可能であるという新たな知見を得たため、Mouse genome上OprmlexonlをヒトOPRMI exon1に置換する方針に変更し、再設計を行った。2.Human MOR cDNAにA118G mutationを挿入し、そのexon1部分をPCR増幅した。3.Knockinマウス作製用ターゲティングベクターの構築;BAC CIoneを鋳型として増幅したarm(long及びshort)、human MOR exon1(Wild-type or Mutation-type)、1oxp/ne/1oxp、DT-A配列を連結し、2種類(Wild-type, Mutation-type)のターゲティングベクターを作製した。4.ES細胞の培養、ES細胞へのターゲティングベクターの導入に取りかかったが、技術の習得に時間を要し、相同組換え体の同定には至らなかった。

About 70% of cancer patients experience に cancer pain が and すると われて る る. し か し, オ ピ オ イ ド susceptibility の personal bad が big き い こ と, optimal are using の た め の based エ ビ デ ン ス が less な い こ と か ら, unseen な pain treatment が な さ れ て い な い. This study は, pain と の masato even が blame さ れ て い る ヒ ト の heritage 伝 son polymorphism (A118G) に attention し, ヒ ト type heritage 伝 son type more を す る mu オ ピ オ イ ド by let body (MOR) heritage 伝 son 発 now マ ウ ス を オ ピ オ イ ド sensitivity poor personal の モ デ ル と し て cropping す る こ と で, a 々 の patients へ の appropriate な オ ピ オ イ ド pain therapy Youdaoplaceholder0 establish させる とを とを purpose とする. H18 annual に ヒ ト - aliens (A118G) mu オ ピ オ イ ド by let body (MOR) posthumous son 伝 Knockin マ ウ ス for making タ ー ゲ テ ィ ン グ ベ ク タ ー の design を end し て い る た め, our は, ベ ク タ ー の construct homework か ら group take り ん だ. The <s:1> を, his <s:1> research グ プによる プによる プによる research schedule によ, the original <s:1> research plan を changes are more する necessary が to じた. The research achievements of the current year are as follows である である. 1. Redesign of Knockin ウス ウス for manufacturing タ ゲティ ゲティ ゲティ グベ グベ タ タ タ タ ウス; Last year, the コド and ウス ウスMOR 伝 substron (Oprm1)exon1 substrons began the コド に にhuman MOR cDNAを introduction する policy で design of た た. し か し, こ の way で は full て の マ ウ ス internality Oprmvariants の 発 now を knockout す る こ と は impossible で あ る と い う new た な knowledge を have た た め, Mouse genome on Oprmlexonl を ヒ ト OPRMI exon1に replaces する policy に to change <s:1> and redesign を rows った. 2.Human MOR cDNAにA118G mutationを inserted with <s:1> and そ sequenced exon1 part をPCR increase た た. 3.Knockin タ ウス is fabricated using タ ゲティ ゲティ ゲティ グベ タ タ タ タ rods; BAC CIoneを casting と て て amplitude-increasing <s:1> たarm(long and びshort), human MOR exon1(Wild-type or Mutation-type), 1oxp/ne/1oxp, DT-A combination を link <e:1>, 2 types (Wild-type) Mutation (type) タ タ ゲティ ゲティ グベ グベ タ タ を を make た. 4. の ES cell culture, ES cells へ の タ ー ゲ テ ィ ン グ ベ ク タ ー の import に take り か か っ た が, technology を to し に の acquisition time, the same group in の え body with constant に は to ら な か っ た.