TLX転写共役因子複合体の同定と解析による、神経幹細胞未分化維持機構の解明

通过TLX转录辅助因子复合物的鉴定和分析阐明维持神经干细胞未分化的机制

• 批准号: 07J04938
• 负责人: 横山 敦
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J04938/
• 关键词: オーファン核内受容体; ヒストン脱メチル化酵素; 神経幹細胞; 転写共役因子; TLX; LSD1

ヒト網膜芽細胞腫由来細胞株Y79細胞を大量培養し、核抽出液を取得する実験系を確立し、オーファン核内受容体に結合する転写共役因子複合体としてヒストン脱メチル化酵素LSD1複合体を見出した。その後の解析により、LSD1はTLXに直接結合し、ヒストン脱メチル化活性によりTLXの転写抑制機能を担っている共役転写抑制因子であることが判明した。さらに、LSD1はヒストン脱アセチル化酵素であるHADc1/2をリクルートし、そのヒストン脱アセチル化活性を発揮させていることがわかった。また、TLXはLSD1複合体を標的遺伝子上にリクルートすることにより、標的遺伝子の一つであるPTEN遺伝子の発現を抑制し細胞増殖を正に制御していることが示唆されるデータを得ることが出来た。これらの結果は、原著論文として科学誌に掲載された。(Yokoyama et al,Mol Cell Biol,in press)さらに、LSD1転写共役因子複合体が各細胞株において異なった構成因子により存在するとの仮説のもと、様々な肺胞株を用いて生化学的な精製実験を行ったところ、マウス神経芽腫由来細胞株Neuro2a細胞の核抽出液から新規の相互作用因子の取得に成功し、数種類の新規LSD1複合体構成因子を同定することに成功することができた。なかでも、神経細胞特異的に発現する因子を数種得ることができたため、これらの因子について神経分化における役割について現在鋭意解析中である。

ヒ ト retinal bud cells swollen origin cell line Y79 cells を mass culture し, nuclear extract を obtain す る be 験 を established し, オ ー フ ァ ン nuclear within the capacity of body に combining す る factor complex planning to write a total service と し て ヒ ス ト ン メ off チ ル phenoloxidase LSD1 complex を shows し た. そ の の after parsing に よ り, LSD1 は TLX に directly combining し, ヒ ス ト ン メ off チ ル change active に よ り TLX の planning write function of inhibiting を bear っ て い る planning a total service write inhibitory factor で あ る こ と が.at し た. さ ら に, LSD1 は ヒ ス ト ン ア off セ チ ル phenoloxidase で あ る HADc1/2 を リ ク ル ー ト し, そ の ヒ ス ト ン ア off セ チ ル change active を 発 swing さ せ て い る こ と が わ か っ た. ま た, TLX は LSD1 complex を mark heritage in に 伝 リ ク ル ー ト す る こ と に よ り, mark but 伝 の a つ で あ る PTEN heritage 伝 son の 発 を を inhibiting し cell raised colonization are now に suppression し て い る こ と が in stopping さ れ る デ ー タ を have る こ と が た. The results are れら and the original paper is と て て て published in the journal of science に された. (Yokoyama et al,Mol Cell Biol,in Press) さ ら に, LSD1 factor complex planning to write a total service が each cell lines に お い て different な っ た constitute factor に よ り exist す る と の 仮 said の も と, others 々 な を lung cell strain with い て biochemical な refined be 験 を line っ た と こ ろ, マ ウ ス god 経 buds swell origin cell lines Neuro2a cells の nuclear extract か ら new rules の の interaction factors Achieved に success に, several types of new regulations on the composition factors of the LSD1 complex を were determined する とに とに success する とがで とがで た た. な か で も, god 経 cell specific に 発 now す る factor を several have る こ と が で き た た め, こ れ ら の factor に つ い て god 経 differentiation に お け る service cut に つ い て now holds the parsing で あ る.

项目成果

ヒストン脱メチル化酵素LSD1による神経分化制御メカニズムの解析

组蛋白去甲基化酶LSD1控制神经元分化的机制分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 横山敦;藤山沙理;北川浩;加藤茂明
• 通讯作者: 加藤茂明