新規パルミトイル化酵素群の活性制御機構の解明

阐明新型棕榈酰化酶组的活性控制机制

• 批准号: 18687008
• 负责人: 深田 正紀
• 金额: $ 19.22万
• 依托单位: National Institute for Physiological Sciences (2007-2008)National Institute for Longevity Sciences,NCGG (2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18687008/
• 关键词: 脂質修飾; パルミトイル化; 酵素; シナプス; 細胞内情報伝達; 蛋白質膜輸送; 質量分析; グルタミン酸受容体; 蛋白質輸送; 生化学

パルミトイル化は他の脂質修飾とは異なり可逆的であり、外界刺激依存性にサイクリングしている。これまでに、我々は全23種類からなる新規パルミトイル化酵素群をゲノムワイドに単離し、その機能解析を進めてきた。今年度はパルミトイル化酵素ファミリーの活性制御機構を明らかにするために、DHHCパルミトイル化酵素に結合する蛋白質を脳組織から特異性高く精製し、高感度質量分析装置を駆使してその構成蛋白質を明らかにした。具体的にはDHHC2結合蛋白質としてDHHC20を含む複数の蛋白質を見出した。また、DHHC3結合蛋白質としてintegrinなど複数の膜蛋白質を同定した。さらに、DHHC8,DHHC21に結合する蛋白質を同様の手法を用いて次々に同定しつつある。これらの解析を通じて、パルミトイル化酵素群のサブファミリー特異的な活性制御機構の一端を明らかにした。一方、我々は前年度までに神経活動の下流でPSD-95パルミトイル化酵素DHHC2の活性がダイナミックに変化することを見出している。今年度はDendra2融合蛋白質を用いたphotoconversion法を駆使して、PSD-95やDHHC2酵素の動態を神経細胞で可視化し、これら蛋白質の動態制御機構を検討した。興味深いことに、神経活動を遮断することによりPSD-95はより膜近傍に集積し、AMPA受容体の恒常性維持に重要な役割を果たしていることを明らかにした。本研究課題は平成20年度科学研究費補助金(若手研究(S))に係る交付内定通知の受理(5月)に伴い、若手研究(S)に専念するため廃止した。

Other lipid modifications are reversible and dependent on external stimuli. All 23 types of enzymes are required to be analyzed separately and functionally. This year, the activity control mechanism of DHC-containing enzyme binds to the protein, and the tissue-specific, high-sensitivity quality analysis device makes the constituent protein clear. Specific DHHC2 binding proteins are found in DHHC20, which contains multiple proteins. DHHC3 binding protein and protein binding protein are identified. DHHC8 and DHHC21 are the same proteins. The analysis of these enzymes is carried out in a transparent manner. The activity of the enzyme DHHC2 in the downstream of the previous year's brain activity was detected. This year, the Dendra2 fusion protein was visualized by photoconversion method, and the dynamics of PSD-95 and DHHC2 enzymes were discussed. The PSD-95 is an important component for the maintenance of the steady-state properties of AMPA receptors. This research project was completed in May 2010 with the approval of the Scientific Research Grant (Wakata Research (S)).

项目成果

Systematic screening for palmitoyl transferase activity of the DHHC protein family in mammalian cells

• DOI: 10.1016/j.ymeth.2006.05.015
• 发表时间: 2006-10-01
• 期刊: METHODS
• 影响因子: 4.8
• 作者: Fukata, Yuko;Iwanaga, Tsuyoshi;Fukata, Masaki
• 通讯作者: Fukata, Masaki

Renal defects associated with improper polarization of the CRB and DLG polarity complexes in MALS-3 knockout mice.

• DOI: 10.1083/jcb.200702054
• 发表时间: 2007-10-08
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Olsen O;Funke L;Long JF;Fukata M;Kazuta T;Trinidad JC;Moore KA;Misawa H;Welling PA;Burlingame AL;Zhang M;Bredt DS
• 通讯作者: Bredt DS

GM1-ganglioside-induced Aβassembly at synaptic sites of cultured neurons.

GM1-神经节苷脂诱导培养神经元突触位点的 Aβ 组装。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochim Biophys Acta 1768
• 作者: Yamamoto;N.;Fukata;Y.;Fukata;M.;Yanaigiswa;K.
• 通讯作者: K.

Impaired activation and localization of LAT in anergic T cells as a consequence of a selective palmitoylation defect

• DOI: 10.1016/j.immuni.2006.03.011
• 发表时间: 2006-05-01
• 期刊: IMMUNITY
• 影响因子: 32.4
• 作者: Hundt, Matthias;Tabata, Hiroki;Altman, Amnon
• 通讯作者: Altman, Amnon

Identification of Golgi-localized acyl transferases that palmitoylate and regulate endothelial nitric oxide synthase.

• DOI: 10.1083/jcb.200601051
• 发表时间: 2006-07-31
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Fernández-Hernando C;Fukata M;Bernatchez PN;Fukata Y;Lin MI;Bredt DS;Sessa WC
• 通讯作者: Sessa WC