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柑橘類脱顆粒抑制成分の腸管における代謝・吸収と活性発現に関する研究

柑橘脱颗粒抑制剂的肠道代谢、吸收及活性表达研究

基本信息

批准号：
18700610
负责人：
小林彰子
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Takasaki University of Health and Welfare
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

すでに我々は温州みかんパウダー(日東富士製粉(株))の50%メタノール抽出画分が肥満細胞からの脱顆粒を抑制することを報告している。本年度は、温州みかんパウダーに含まれる脱顆粒抑制成分を解析した。極性の異なる3種の溶媒、即ちエタノール濃度が0、50、99.5%の水溶液でそれぞれ抽出し、減圧乾固後、最終濃度5mgおよび0.5mg/mlで脱顆粒抑制試験に供した。ラット好塩基球性細胞株RBL-2H3を用い、β-ヘキソサミニダーゼ(酵素活性測定法)およびヒスタミン(HPLC on-column法)の遊離からIgE依存性脱顆粒度を測定した。ポジティブコントロールとしてwortmannin(25μM)を用いた。その結果、エタノール濃度50%および99.5%抽出画分が、β-ヘキソサミニダーゼおよびヒスタミンの遊離を抑制した。99.5%および50%エタノール抽出画分から各種クロマトグラフィーにより活性成分を単離した。EI-MS、FAB-MSとこれらのHR-MS、およびNMR等の機器分析により、4種のポリメトキシフラボン(4',5,7,8-tetramethoxyflavone、tangeretin、nobiletinおよび3,3',4',5,6,7,8-heptamethoxyflavone)および2種のフラバノン配糖体(hesperidinおよびnarirutin)を構造決定した。それぞれの化合物の脱顆粒抑制試験の結果、ヒスタミン遊離とβヘキソサミニダーゼ共に、nobiretin、tangeretin、3,3',4',5,6,7,8-heptamethoxyflavoneは濃度依存的抑制活性を示したのに対し、配糖体であるhesperidinは活性を示さなかった。また、我々は配糖体であるヘスペリジンが腸管上皮細胞上で代謝されヘスペレチンとなることにより抗アレルギー作用を発揮することを報告している。本年度は腸管上皮細胞のモデルであるCaco-2細胞を用いてヘスペレチンおよびヘスペリジンの腸管透過機構を明らかにした。透過性膜上に単層培養したCaco-2細胞に被験物を添加し、管腔側から基底膜側、基底膜側から管腔側への透過性を測定した。測定にはクーロメトリック式HPLC-ECDを用いた。ヘスペレチンは管腔側から基底膜側へエネルギー依存的に極性輸送され、能動的透過機作を示した。ヘスペリジンの透過速度はヘスペレチンの約1/400で、受動的透過機作を示した。現在、さらに詳細なヘスペレチンの腸管透過メカニズムの解析を行っている。

Please tell me, Wenzhou, Fuji powder (plant), 50% Fuji powder, 50% Fuji powder. This year, Wenzhou and Wenzhou are very sensitive to the removal of grains and the inhibition of components in this year. Three kinds of aqueous solvents, namely, the aqueous solution of 0, 50, 99.5% of the temperature, the temperature of the three kinds of solvents, the temperature of the solution, the temperature, the temperature, the The globular cell line RBL-2H3 was determined by the method of enzyme activity assay (HPLC on-column), and the particle size of IgE dependent cell line was determined by the method of enzyme activity assay. Please tell me how to use the wortmannin (25 mu M). The results show that the results are 50%, 99.5%, 99.5%, 99.5%, 99.5%, 99.5%, 99.5% and 99.5%. 99.5%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50%, 50 EI-MS, FAB-MS chips, HR-MS, NMR, etc., and 4 kinds of hesperidin drugs were used to determine the narirutin of 2 kinds of drugs. The results showed that the inhibition activity of heptamethoxyflavone (heptamethoxyflavone) was dependent on the degree of concentration-dependent inhibition of heptamethoxyflavone (heptamethoxyflavone). The results showed that the inhibitory activity of heptamethoxyflavone (heptamethoxyflavone) was not dependent on the concentration of heptamethoxyflavone (heptamethoxyflavone), and that the activity of ribosome hesperidin was shown. The cells of the tube epithelium were divided into two groups: the cells of the tube epithelium, the cells of the tube epithelium. This year, the tube epithelium and the Caco-2 cells have been used to determine the accuracy of the system through the organization. On the permeable membrane, the Caco-2 cells were added, the lumen was added to the basement membrane, and the basement membrane was used to determine the permeability of the lumen. Determine the size of the equipment used in the HPLC-ECD. In this paper, the lumen is used to detect the basement membrane, which is dependent on the mechanical transmission and the ability to move through the machine. The speed is very high, and the speed is very high. The speed is very high. The speed is about 400 kb. Now, we need to make sure that the information is resolved through the analysis of the information.