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Researches on fish adiponectin and lipid and carbohydrate metabolisms

鱼类脂联素与脂质、碳水化合物代谢的研究

基本信息

批准号：
19580233
负责人：
USHIO Hideki
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Tokyo University of Marine Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19580233/
关键词：
脂質糖代謝アディポネクチン糖尿病 AMPK

项目摘要

哺乳類では, 血中アディポネクチンレベルの上昇によって脂肪, 筋および肝細胞における脂質代謝が促進されることが明らかになってきた. また, 哺乳類脂肪細胞の分化や代謝調節において核内受容体PPAR・が重要な働きを担う. 一方, 魚類におけるこれらの存在についてはゼブラフィッシュなどのcDNAおよびESTデータベースによって確認しうるが, 現時点では機能性を有した脂質代謝関連タンパク質が存在するかどうかについては全く情報が得られていない. そこで本研究では, 魚類においても脂質代謝に関与すると考えられるアディポネクチンなどの発現頻度を明らかにし, 脂質代謝調節経路を推定することを目的とした. ニジマスEST配列より, ニジマスアディポネクチンおよび受容体の全配列をin silicoクローニングし, その演繹アミノ酸配列に従って, ニジマスアディポネクチンペプチドを固相合成した. 本ペプチドを用いてウサギ抗血清を作製し, ニジマス肝臓, 血漿等を採取してSDS-PAGEに付し, ウェスタンブロッティングを行った. ウエスタンブロッティングの結果, 認識エピトープの異なる数種類の抗体で交差性が認められるアディポネクチン様成分がニジマス脂肪組織, RTG-2細胞, 血漿に認められることが明らかとなった. 抗ニジマスアディポネクチン抗体が認識するタンパク質は, 哺乳類アディポネクチンに相当する約30k成分以外に高分子成分が認められた. 還元条件下でも同様な傾向を示すことから, ニジマスアディポネクチンはジスルフィド結合以外の相互作用力によって多量体化するものと考えられた.これは, 哺乳類アディポネクチン多量体が還元条件下によって容易に単量体化することと大きく異なった.これらのことから, ニジマスにおけるアディポネクチンの作用メカニズムは哺乳類の多量体アディポネクチンシステムと類似しているものと推定された. ニジマスアディポネクチン受容体には1a, 1bおよび2の3種のアイソフォームが存在するものと推定されたが, 1aは膜貫通回数が少なく, 生理的に機能しないものと推定された.

Mammals, fat in the blood increases, Muscle liver cells におけるLipid metabolism が promotion されることが明らかになってきた. また, The differentiation and metabolic regulation of mammalian adipocytes is important for the nuclear receptor PPAR. fish fishのcDNAおよびESTデータベースによってconfirmationしうるが, The current point is that the functionality of the lipid metabolism is related to the existence of the lipid metabolism and the existence of the substance.そこでThis research is では, Fish lipid metabolism and lipid metabolism, Lipid metabolism regulation 経路をESTIMATION することをPurpose とした. ニジマスEST arrangement より,ニジマスアディポネクチンおよびReceiver's full arrangement をin silicoクローニングし, その译アミノAcid coordination に従って, ニジマスアディポネクチンペプチドをsolid phase synthesis した. This product is produced using anti-serum, SDS-PAGE, etc.ウェスタンブロッティングを行った. ウエスタンブロッティングの results, Recognition of various types of antibodies and their cross-reference properties, recognition of various types of antibodies, and its components: adipose tissue, RTG-2 cells, Plasma められることが明らかとなった． Mammalian アディポネクチンに is equivalent to a polymer component other than about 30k ingredients. Under the original condition, the tendency of the same でもでとから is shown,ニジマスアディポネクチンはジスルフィド mutuality other than combination The force of action is a large amount of body, Mammalian アディポネクチン multi-volume body が reduction condition によって easy に単quantity body することと大きくdifferent なった.これらのことから, ニジマスにおけるアディポネクチンの Effect メカニズムは Mammalian の多The measurement of the body is similar to the measurement of the body.ニジマスアディポネクチンReceiver には1a, 1b および2の3 kinds of のアイソフォームがexistent するものと presumed されたが, 1aはfilm penetration number of times が小なく, Physiological function is presumed.