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Expression, purification and crystallization of leukotriene B4 receptor in yeast expression system
白三烯B4受体在酵母表达系统中的表达、纯化和结晶
基本信息
- 批准号：19770095
- 负责人：
- 金额：$ 2.35万
- 依托单位：
- 依托单位国家：日本
- 项目类别：Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份：2007
- 资助国家：日本
- 起止时间：2007 至 2008
- 项目状态：已结题
- 来源：
- 关键词：
项目摘要
結晶化に向けてメタノール資化酵母によるモルモット由来ロイコトリエンB_4(LTB_4)受容体(BLT1)の大量発現系構築を行った。100種類を超える変異体実験の結果、特にアミノ酸残基1-14番欠損体/Ser309リン酸化部位変異体(dN15/S309A)の^3H-LTB_4親和性は、Kd=7.6nM,Bmax=57.5pmol/mgであり、生体組織中のBLT1の親和性と同程度であった。1L培養スケールで180・gの精製サンプルを調製した。SDS-PAGEでの分子量は約40kDであるが、ゲルろ過では分子量約100kDであり、二量体で精製されていることになる。
朝向结晶，由甲醇辅助的酵母构建了豚鼠的白细胞B_4（LTB_4）受体（BLT1）的大规模表达系统。在100多个突变实验中， ^3H-LTB_4亲和力，尤其是对于氨基酸残基1-14/Ser309磷酸化位点突变体（DN15/S309A），kd = 7.6nm，Bmax = 57.5.5pmol/mg，与Bltt1相似，与Blt1相似。以1L培养量表制备了180.G的纯化样品。 SDS-PAGE的分子量约为40 kD，但凝胶过滤的分子量约为100 kD，这意味着它已用二聚体纯化。
项目成果
期刊论文数量（0）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Crystal structure of squid rhodopsin with intracellularly extended cytoplasmic region
- DOI：10.1074/jbc.c800040200
- 发表时间：2008-06-27
- 期刊：
- 影响因子：4.8
- 作者：Shimamura, Tatsuro;Hiraki, Kenji;Miyano, Masashi
- 通讯作者：Miyano, Masashi
Membrane protein crystallography for structure-based drug design
用于基于结构的药物设计的膜蛋白晶体学
- DOI：
- 发表时间：2009
- 期刊：
- 影响因子：0
- 作者：Miyano;M.;Ago;H.;and Hori;T.
- 通讯作者：T.
Leukotriene B_4 12-hydroxydehydrogenase/15-oxo-prostaglandin 13-reductase complex structure with anticonfiguration of indomethacin
白三烯B_4 12-羟基脱氢酶/15-氧代前列腺素13-还原酶复合物结构与吲哚美辛的反构型
- DOI：
- 发表时间：2007
- 期刊：
- 影响因子：0
- 作者：asuda D;Okuno T;Yokomizo T;Hori T;Hirota N;Hashidate T;Miyano M;Shimizu T;Nakamura M.;Daisuke Yasuda;堀哲哉
- 通讯作者：堀哲哉
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