Expression, purification and crystallization of leukotriene B4 receptor in yeast expression system
白三烯B4受体在酵母表达系统中的表达、纯化和结晶
基本信息
- 批准号:19770095
- 负责人:
- 金额:$ 2.35万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2007
- 资助国家:日本
- 起止时间:2007 至 2008
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
結晶化に向けてメタノール資化酵母によるモルモット由来ロイコトリエンB_4(LTB_4)受容体(BLT1)の大量発現系構築を行った。100種類を超える変異体実験の結果、特にアミノ酸残基1-14番欠損体/Ser309リン酸化部位変異体(dN15/S309A)の^3H-LTB_4親和性は、Kd=7.6nM,Bmax=57.5pmol/mgであり、生体組織中のBLT1の親和性と同程度であった。1L培養スケールで180・gの精製サンプルを調製した。SDS-PAGEでの分子量は約40kDであるが、ゲルろ過では分子量約100kDであり、二量体で精製されていることになる。
Crystallization に to け て メ タ ノ ー ル endowment the yeast に よ る モ ル モ ッ ト origin ロ イ コ ト リ エ ン B_4 (LTB_4) by the capacity of body (BLT1) の large 発 now line build を っ た. Experimental <s:1> results of 100 types of を super える variants, special にア ノ ノ acid residue 1-14 subdamaged form /Ser309リ <s:1> acidified site variant (dN15/S309A) <s:1> ^3H-LTB_4 affinity, Kd=7.6nM,Bmax=57.5pmol/mgであ, <s:1> BLT1 affinity in biological tissue Youdaoplaceholder0 to the same extent であった. 1L culture スケ スケ で で で180 · g <s:1> refinement サ た プ を を modulation た た. Sds-page で の は molecular weight about 40 kd で あ る が, ゲ ル ろ too で は molecular weight about 100 kd で あ り, quantity body で refined さ れ て い る こ と に な る.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Membrane protein crystallography for structure-based drug design
用于基于结构的药物设计的膜蛋白晶体学
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Miyano;M.;Ago;H.;and Hori;T.
- 通讯作者:T.
Crystal structure of squid rhodopsin with intracellularly extended cytoplasmic region
- DOI:10.1074/jbc.c800040200
- 发表时间:2008-06-27
- 期刊:
- 影响因子:4.8
- 作者:Shimamura, Tatsuro;Hiraki, Kenji;Miyano, Masashi
- 通讯作者:Miyano, Masashi
Leukotriene B_4 12-hydroxydehydrogenase/15-oxo-prostaglandin 13-reductase complex structure with anticonfiguration of indomethacin
白三烯B_4 12-羟基脱氢酶/15-氧代前列腺素13-还原酶复合物结构与吲哚美辛的反构型
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:asuda D;Okuno T;Yokomizo T;Hori T;Hirota N;Hashidate T;Miyano M;Shimizu T;Nakamura M.;Daisuke Yasuda;堀哲哉
- 通讯作者:堀哲哉
Helix 8 of leukotriene B_4 type-2 receptor is required for the folding to pass the quality control in the endoplasmic reticulum.
白三烯 B_4 2 型受体的螺旋 8 是折叠通过内质网质量控制所必需的。
- DOI:
- 发表时间:2009
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Yasuda D;他8名
- 通讯作者:他8名
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