Crystallization of stabilized leukotriene B4 receptor mutant and monoclonal antibody complex.

稳定的白三烯 B4 受体突变体和单克隆抗体复合物的结晶。

• 批准号: 23770133
• 负责人: HORI Tetsuya
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23770133/
• 关键词: ロイコトリエンB_4 受容体; G-タンパク質共役型受容体; メタノール資化酵母; 安定化変異体; モノクローナル抗体; 大量発現; 精製; 結晶化; ロイコトリエンB4受容体; 安定化; モノクロ抗体作成; GPCR; 熱安定化; 大量調製

For the crystallization of leukotriene B_4 receptor (BLT1), the stabilized mutant was constructed and the anti-BLT1 monoclonal antibody which recognized three-dimensional structure of BLT1 was generated. The rationally designed two point mutations were improved the thermal-stability by 5 ℃ and the expression level of active form BLT1 by 6 times (Bmax=311 pmol/mg). The antibody which bound the none-denatured BLT1 but did not recognize the SDS-denatured BLT1 was generated. The crystallization of BLT1-Fab complex has been promoted.

针对白三烯B_4受体（BLT1）的结晶，构建了稳定突变体，生成了识别BLT1三维结构的抗BLT1单克隆抗体。合理设计的两个点突变使其热稳定性提高了5℃，活性形式BLT1的表达量提高了6倍（Bmax=311 pmol/mg）。生成了结合未变性BLT1但不识别sds变性BLT1的抗体。促进了BLT1-Fab配合物的结晶。

项目成果

Thermostabilization and generation of monoclonal antibody to leukotriene B_4 receptor (BLT1) for crystallization,

用于结晶的白三烯 B_4 受体 (BLT1) 单克隆抗体的热稳定性和生成，

• 发表时间: 2011
• 作者: Hori T.;Sugahara M.;Nakamura M.;Yokomizo T.;Shimizu T.;and Miyano M.
• 通讯作者: and Miyano M.

結晶化のためのロイコトリエンB_4受容体(BLT1)の熱安定化と抗BLT1モノクローナル抗体の作製

白三烯 B_4 受体 (BLT1) 的热稳定性用于抗 BLT1 单克隆抗体的结晶和生产

• 发表时间: 2011
• 作者: 堀 哲哉;菅原光明;中村元直;横溝岳彦;清水孝雄;宮野雅司
• 通讯作者: 宮野雅司

Thermostabilization and generation of monoclonal antibody to leukotriene B4 receptor (BLT1) for crystallization

用于结晶的白三烯 B4 受体 (BLT1) 单克隆抗体的热稳定性和生成

• 发表时间: 2011
• 作者: Nakano M;Ota F;Nakajima K;Taniguchi N;Kavallaris M;Packer N;堀 哲哉
• 通讯作者: 堀 哲哉