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糖鎖情報を利用したがん幹細胞マーカーの探索と腫瘍標的システム

利用聚糖信息搜索癌症干细胞标记物和肿瘤靶向系统

基本信息

批准号：
19659144
负责人：
岡田尚巳
金额：
$ 1.98万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

幹細胞への外来遺伝子の導入に必要な諸条件を検討した。この際、骨髄由来間葉系幹細胞を標的細胞として用い、幹細胞のマーカーとして、CD271に着目した。CD271は神経成長因子受容体(NGFR)であるが、未分化性を維持させる分化制御因子としての作用を有する。間葉系幹細胞として、イヌ骨髄液から磁気ビーズ法によりCD271陽性分画を回収し、この細胞集団が高い増殖性と未分化性を維持していることを確認した。また、前年度開発した相同組換えを応用したアデノウイルスゲノム上への外来遺伝子挿入技術を応用し、筋分化誘導因子であるMyoD発現ベクターを構築した。このベクターを分化誘導スイッチとして用い、間葉系幹細胞で一過性にMyoDを強制発現することにより、簡便な細胞分化誘導方法を確立した。この際、ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤を併用することによって、分化誘導効率が改善できることを見出した。まず、分化誘導細胞をマウス骨格筋に移植し、移植細胞の生着を確認した。同時に、炎症制御因子IL-10を局所的に作用させると移植効率が向上することを確認した。さらに、ビーグル犬を用いて同種移植を実施した。リンパ球抗原の一致した個体間でドナーとレシピエントを選定し、分化誘導因子遺伝子を導入したドナー由来細胞をレシピエントの前肢および後肢に局所移植したところ、移植細胞は移植領域に3ヶ月間にわたり生存・生着していることが確認できた。生着細胞は筋線維様の形態を示しており、分化マーカーの発現様式から組織再生過程にあることが示唆された。

There are various conditions necessary for the introduction of stem cells and foreign genes. The target cells are derived from mesenchymal stem cells, stem cells are target cells, and CD271 targets cells. CD271 is a natural growth factor receptor (NGFR), an undifferentiated maintenance factor, and a differentiation control factor. Mesenchymal stem cell stem cells, stem cells, bone marrow fluid, magnetic stem cell method, CD271 positive analysis, The collection of cells and their high proliferative and undifferentiated properties were confirmed and maintained.また、The same group of えを応用したアデノウイルスゲノム上への Foreign Heritage was opened in the previous year The denture insertion technology is used and the muscle differentiation inducing factor is constructed using MyoD. The method of inducing differentiation of cells is established, the method of inducing differentiation of mesenchymal stem cells is a transient method, MyoD is forced to appear, and the simple method of inducing cell differentiation is established. The combined use of することによって and the ヒストン deactivation enzyme inhibitor inhibitor することによっが improves the differentiation induction efficiency できることを见出した.まず、Differentiation induced cells をマウスbone grid に transplantation し、The growth of transplanted cells をconfirmation した. At the same time, it has been confirmed that the local role of the inflammatory control factor IL-10 has improved the transplantation efficiency.さらに、ビーグル狗を Use いて homogeneous transplantation を実用した. The homogeneity of the leukocyte antigen between individuals has been selected, and the differentiation-inducing factor has been introduced into the cells from which it was derived. The transplantation of the forelimbs and hindlimbs is done, and the transplanted cells are transplanted in the field of transplantation. The survival and birth of the transplanted cells are confirmed. The growth of cells, the shape of the tendon line, and the process of differentiation and tissue regeneration.