ドライマウスの分類および診断基準の確立～唾液を用いた新しい診断方法について～

口干的分类和诊断标准的建立〜关于使用唾液的新诊断方法〜

基本信息

批准号：
19659532
负责人：
中村誠司
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

ドライマウスの代表的疾患はシェーグレン症候群であるが、糖尿病や腎疾患などの全身疾患、薬物、ストレスなどの種々の原因によっても引き起こされるため、その的確な診断と治療は容易ではない。本研究の最終目標は、鑑別診断のためだけではなく、経過に応じて繰り返し施行できる非侵襲的な検査方法の確立である。従来の研究により、唾液中にシェーグレン症候群の診断や病態の把握に有用な物質が存在することが示唆されたため、本研究ではその知見をもとに唾液を用いた新たな検査方法を確立することが目的である。今年度は、シェーグレン症候群の病態進展に注目し、刺激時・安静時唾液を採取した。測定方法としては、cytometric bead arraysystemという高感度かつ微量の検体で解析できる方法を用いたが、この方法は特定のタンパクに対するモノクローナル抗体で標識した一定の蛍光を発するビーズを用い、サンドイッチ法にて唾液と反応させ、その後にフローサイトメトリーによりタンパクの定量を行うシステムである。さらに、異なる蛍光強度を有するビーズを用いることで、微量のサンプルから同時に数種類の物質の濃度を測定することができるという利点がある。T細胞由来のサイトカイン(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12、IFN-γ、TNF-α)に対する抗体、T細胞サブセットの浸潤に関わるケモカイン(IP-10、RANTES、MIP-1α、MCP-1、TARC、MDC)に対する抗体、ヒトのインムノグロブリンに対する抗体、さらにはSS-AおよびSS-B抗原で標識したビーズを用い、それぞれの定量化を行った。その結果シェーグレン症候群患者では、軽度リンパ球浸潤症例と比較して、重度の症例では、Th2タイプであるIL-4、IL-10、MCP-1、MDCが高濃度に含まれていた。今年度踏まえた、シェーグレン症候群の重症度によってもこれらの濃度が異なり、シェーグレン症候群の病態の把握が可能であることも示唆された。さらにIL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-αはシェーグレン症候群の診断マーカーに、IL-4、IL-10、MCP-1 MDCはシェーグレン症候群の病態進展のマーカーになると考えられる。

口干中的典型疾病是Sjogren综合征，但它也是由多种原因（例如糖尿病和肾脏疾病，药物和压力）等多种原因引起的，因此准确诊断和治疗并不容易。这项研究的最终目标是建立一种非侵入性测试方法，不仅可以重复执行，不仅是用于鉴别诊断，而且还用于建立一种非侵入性测试方法，该方法可以根据研究的过程重复执行。先前的研究表明，有针对诊断Sjogren综合征并了解该疾病病理的物质，因此本研究旨在根据这一发现建立一种使用唾液测试的新方法。今年，我们专注于Sjogren综合征的进展，并在刺激和休息期间收集唾液。作为一种测量方法，使用了一种高度敏感的方法，称为细胞仪阵列系统，允许使用少量标本进行分析。该方法使用珠子，该珠子发出了用单克隆抗体标记的恒定荧光对特定蛋白的标记，使用三明治方法与唾液反应，然后通过流式细胞仪进行定量蛋白质。此外，通过使用具有不同荧光强度的珠，可以从少量样品中同时测量几种不同物质的浓度。使用针对T细胞衍生细胞因子（IL-1β，IL-2，IL-4，IL-5，IL-5，IL-6，IL-6，IL-8，IL-8，IL-10，IL-10，IL-10，IL-11，IFN-γ，TNF-α）进行定量进行定量人类免疫球蛋白，并用SS-A和SS-B抗原标记的珠子。结果，与轻度淋巴细胞浸润病例相比，患有Sjogren综合征的患者具有较高的Th2类型，在严重病例中，IL-4，IL-10，IL-10，MCP-1和MDC。基于这个财政年度，这些浓度取决于Sjogren综合征的严重程度，这表明可以理解Sjogren综合征的病理。此外，IL-1β，IL-6，IL-8，IL-10和TNF-α是Sjogren综合征的诊断标记物，而IL-4，IL-10和MCP-1 MDC被认为是Sjogren综合征进展的标记。