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mRNP顆粒の形成と分解の分子機構の解明

阐明mRNP颗粒形成和分解的分子机制

基本信息

批准号：
20200065
负责人：
松本健
金额：
$ 20.38万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research a proposed research project)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20200065/
关键词：
遺伝子発現制御 mRNA安定性 mRNP P-body

项目摘要

真核細胞内ではmRNAはつねに特定の蛋白質との複合体mRNPとなっている。そのため、mRNP構成因子はmRNAの安定性や翻訳の調節に重要な役割を果たす。免疫染色やGFP-融合蛋白質の観察により、mRNP構成因子の多くが、細胞質で顆粒状に局在することがわかっている。本研究では、これら細胞質mRNP顆粒(P-bodyやストレス顆粒)の形成と分解の機構について調べた。P-bodyとストレス顆粒では、共通に見られる構成因子もあるが、一部、各顆粒特異的な構成因子もあることが知られている。1)カエル卵母細胞の母性mRNPに特異的な構成因子P100/Patlaは翻訳を抑制する活性を持つが、その局在を見ると、もう一つのmRNP構成因子RAP55Aとは異なって卵母細胞で顆粒状の局在は見られなかった。体細胞に発現するパラログであるPatlbはP-bodyに局在した。2)ヒトRAP55Aは、内在性蛋白質の免疫染色でP-bodyおよびストレス顆粒に局在が見られるが、HeLa細胞に高発現させると大きな顆粒の形成がみられた。これらの顆粒には、P-bodyおよびストレス顆粒に特異的なマーカーが両方とも存在していた。3)RAP55AのパラログであるRAP55Bも、HeLa細胞に発現させるとP-bodyに局在し、高発現で大きな顆粒の形成がみられることがわかった。一方、RAP55AをノックダウンするとP-bodyが消失するので、これらの結果は、細胞内でのRAP55Aの量がmRNP顆粒形成の調節に重要であることを示す。

In eukaryotes, there are mRNA and protein complexes called mRNP. mRNP components are important for mRNA stability and regulation. Immunostaining, detection of GFP-fusion protein, multiple mRNP components, cytoplasmic granular structure In this study, the mechanism of formation and decomposition of cytoplasmic mRNP particles (P-body particles) was investigated. P-body: particles, common components, individual components 1) The maternal mRNP specific component P100/Patla inhibits the activity of RAP55A in oocytes. Somatic cell development is the most important aspect of P-body development. 2) RAP55A is an intrinsic protein and immunostaining for P-body and particle formation in HeLa cells. The particle size is small, and the particle size is small. 3) RAP55A and RAP55B were detected in HeLa cells, and P-body was detected in the cells. On the one hand, RAP55A is important for the regulation of mRNP particle formation due to the disappearance of P-body.