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mRNP顆粒の形成と分解の分子機構の解明

阐明mRNP颗粒形成和分解的分子机制

基本信息

批准号：
20200065
负责人：
松本健
金额：
$ 20.38万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research a proposed research project)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20200065/
关键词：
遺伝子発現制御 mRNA安定性 mRNP P-body

项目摘要

真核細胞内ではmRNAはつねに特定の蛋白質との複合体mRNPとなっている。そのため、mRNP構成因子はmRNAの安定性や翻訳の調節に重要な役割を果たす。免疫染色やGFP-融合蛋白質の観察により、mRNP構成因子の多くが、細胞質で顆粒状に局在することがわかっている。本研究では、これら細胞質mRNP顆粒(P-bodyやストレス顆粒)の形成と分解の機構について調べた。P-bodyとストレス顆粒では、共通に見られる構成因子もあるが、一部、各顆粒特異的な構成因子もあることが知られている。1)カエル卵母細胞の母性mRNPに特異的な構成因子P100/Patlaは翻訳を抑制する活性を持つが、その局在を見ると、もう一つのmRNP構成因子RAP55Aとは異なって卵母細胞で顆粒状の局在は見られなかった。体細胞に発現するパラログであるPatlbはP-bodyに局在した。2)ヒトRAP55Aは、内在性蛋白質の免疫染色でP-bodyおよびストレス顆粒に局在が見られるが、HeLa細胞に高発現させると大きな顆粒の形成がみられた。これらの顆粒には、P-bodyおよびストレス顆粒に特異的なマーカーが両方とも存在していた。3)RAP55AのパラログであるRAP55Bも、HeLa細胞に発現させるとP-bodyに局在し、高発現で大きな顆粒の形成がみられることがわかった。一方、RAP55AをノックダウンするとP-bodyが消失するので、これらの結果は、細胞内でのRAP55Aの量がmRNP顆粒形成の調節に重要であることを示す。

In eukaryotes, there are mRNA and protein complexes called mRNP. mRNP components are important for mRNA stability and regulation. Immunostaining, detection of GFP-fusion protein, multiple mRNP components, cytoplasmic granular structure In this study, the mechanism of formation and decomposition of cytoplasmic mRNP particles (P-body particles) was investigated. P-body: particles, common components, individual components 1) The maternal mRNP specific component P100/Patla inhibits the activity of RAP55A in oocytes. Somatic cell development is the most important aspect of P-body development. 2) RAP55A is an intrinsic protein and immunostaining for P-body and particle formation in HeLa cells. The particle size is small, and the particle size is small. 3) RAP55A and RAP55B are detected in HeLa cells, and the formation of large particles in the P-body is very serious. On the one hand, RAP55A is important for the regulation of mRNP particle formation due to the disappearance of P-body.