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細胞周期調節に関与するRNA結合蛋白質の解析

参与细胞周期调节的 RNA 结合蛋白分析

基本信息

批准号：
16026248
负责人：
松本健
金额：
$ 2.37万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16026248/
关键词：
細胞周期 RNA結合蛋白質翻訳(蛋白質合成)翻訳調節 DT40細胞

项目摘要

細胞周期の進行には、特定の蛋白質の合成と分解が特定の時期に起きることが必要であることが知られている。本研究はその中でも蛋白質合成の調節に関わる因子に着目して、それらが細胞周期、細胞増殖に果たす機能を探ることを目的とした。細胞内でmRNAは特定の蛋白質との複合体であるmRNPとして存在するが、翻訳活性調節にはmRNPを構成する蛋白質が重要な役割を果たすと考えられる。そこで、カエル卵母細胞から卵成熟の段階、初期胚および培養細胞を材料として、mRNPを構成する蛋白質が細胞周期調節に果たす役割を検討した。1.まず、mRNPの主要構成因子であるY-ボックス蛋白質YB-1の遺伝子欠損株は細胞増殖の遅延と蛋白質合成の低下が認められるので、YB-1のターゲットとなる特定のmRNAの検索を行った。2.Y-ボックス蛋白質とRNAに依存して複合体を作るRNA結合蛋白質を見いだし、抗体を作製してこの蛋白質の卵成熟や初期発生に果たす役割を検討した。しかし現在までに、抗体の微小注入やこの蛋白質の高発現などによっても、卵成熟過程への効果は見られていない。この蛋白質のヒトホモログの培養細胞での発現をsiRNAによって抑制すると、細胞増殖の遅延がみとめられた。この蛋白質はmRNAに結合させるとそのmRNAの翻訳を抑制するので、特定のmRNAの翻訳調節に関与して細胞増殖に関与する可能性が考えられる。つぎに、免疫染色によってこの蛋白質の局在を観察した。この蛋白質は細胞質に存在し、細胞質にいくつかの点状に強い局在を示した。この点の数は細胞周期に伴って変化し、M期には点が減少した。これらの点はmRNA分解に関わる酵素の局在と一致し、この蛋白質のmRNA分解への関与が予想された。

Cell cycle progression, synthesis and decomposition of specific proteins The aim of this study is to explore the role of factors involved in the regulation of protein synthesis, cell cycle and proliferation. The mRNP complex in the cell is important for the regulation of mRNP activity. Oocyte maturation stage, embryonic stage, and cell culture stage are discussed. 1. YB-1 gene expression of the main components of mRNA and protein is impaired in cell proliferation and protein synthesis. 2. RNA binding proteins, antibody binding proteins, and protein development in early egg maturation are discussed in this paper. The results of the egg maturation process can be seen in the microinjection of antibodies, high protein production, and high protein production. The expression of this protein in cultured cells is inhibited by siRNA, and the proliferation of cells is inhibited by siRNA. The possibility that this protein binds to mRNA and inhibits mRNA transcription and regulation of specific mRNA transcription is examined. Immunostaining is used to detect the presence of protein. The protein is present in the cytoplasm, and the cytoplasm is present in the point. The number of points in the cell cycle changes, and the number of points in M decreases. The enzymes involved in mRNA decomposition are related to protein mRNA decomposition.