細胞周期調節に関与するRNA結合蛋白質の解析

参与细胞周期调节的 RNA 结合蛋白分析

• 批准号: 13043054
• 负责人: 松本 健
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13043054/
• 关键词: RNA結合蛋白質; 翻訳調節; 細胞増殖; 細胞周期

動物細胞内ではmRNAはつねに特定の蛋白質との複合体であるmRNPとして存在する。細胞質におけるmRNPの主要RNA結合コンポーネントとしてY-ボックス蛋白質がある。本研究では、Y-ボックス蛋白質がmRNAとどのような複合体を形成して細胞増殖にどのような影響を与えるかを検討した。まず、アフリカツメガエル卵母細胞の貯蔵mRNPを構成するY-ボックス蛋白質であるFRGY2蛋白質とmRNAとを試験管内でインキュベートすると、安定なFRGY2-mRNA複合体の形成が観察された。この複合体をウサギ網状赤血球ライセート無細胞系に添加したところ、その翻訳効率は裸のmRNAに比べて大きく低下していた。また、FRGY2との複合体の形成により、mRNAのRNase感受性が低下することがわかった。これらの結果は、このFRGY2-mRNA複合体は、FRGY2によってmRNAがパッケージされたものであり、母性mRNAを卵母細胞内で翻訳させずに安定に長期間保存するという貯蔵mRNPの機能を再現するものであることを示している。一方、体細胞でのY-ボックス蛋白質の機能を探るため、トリDT40細胞でのY-ボックス蛋白質(YB1)遺伝子破壊株を作成した。YB1蛋白質はDT40細胞抽出液中でmRNPおよびpolysome画分に検出され、翻訳調節への関与が予想された。このYB1遺伝子破壊株では、野生株に比べて細胞増殖速度の低下、および蛋白質合成能の低下が認められたが、細胞周期の特定の時期の遅延は観察されなかった。この結果は、YB1蛋白質が翻訳調節を介して細胞増殖に重要な役割を果たしていることを示唆する。

Specific <s:1> protein と <s:1> complex であるmRNPと て て exist in animal cells する. Cytoplasm に お け る mRNP の main rna-binding コ ン ポ ー ネ ン ト と し て Y - ボ ッ ク ス protein が あ る. This study で は, Y - ボ ッ ク ス protein が mRNA と ど の よ う な complex を form し て cells raised colonization に ど の よ う な influence を and え る か を beg し 検 た. ま ず, ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル oocytes の storage 蔵 mRNP を constitute す る Y - ボ ッ ク ス protein で あ る FRGY2 protein と mRNA と を test tube で イ ン キ ュ ベ ー ト す る と, stable な FRGY2 - mRNA complex の form が 観 examine さ れ た. こ の complex を ウ サ ギ mesh red blood corpuscle ラ イ セ ー ト no cell line に add し た と こ ろ, そ の turn 訳 sharper rate は naked の mRNA に than べ て big き く low し て い た. The また and FRGY2と <s:1> complex <e:1> forms によ, and the mRNA <s:1> RNase sensitivity が is low する とがわ とがわ とがわ った った. こ れ ら の results は, こ の FRGY2 - mRNA complex は, FRGY2 に よ っ て mRNA が パ ッ ケ ー ジ さ れ た も の で あ り, maternal mRNA を oocytes in で turn 訳 さ せ ず に stability between に long-term preservation す る と い う storage 蔵 mRNP の function を reappearance す る も の で あ る こ と を shown し て い る. Party, somatic で の Y - ボ ッ ク ス protein の function を agent る た め, ト リ DT40 cells で の Y - ボ ッ ク ス broken 壊 strains (YB1) but 伝 protein sequence を made し た. In the YB1 protein <s:1> DT40 cell extract, the でmRNPおよびpolysome is divided into に検 され, 訳 regulation へ <s:1> relations and が preconception された. こ の YB1 heritage 伝 son broken 壊 strains で は, wild strains に than べ て cells raised colonization rate の is low, お よ び low protein synthesis can の が recognize め ら れ た が, cell cycle specific の の の 遅 delay は 観 examine さ れ な か っ た. こ の results は, YB1 が turn 訳 regulate を interface し て cells raised colonization に important な "を cut fruit た し て い る こ と を in stopping す る.

项目成果

Hattori, A. et al.: "Genomic organization of the human adipocyte-derived leucine aminopeptidase gene and its relationship to the placental leucine aminopeptidase/oxytocinase gene"Journal of Biochemistry. 130. 235-241 (2001)

Hattori，A.等人：“人脂肪细胞来源的亮氨酸氨肽酶基因的基因组结构及其与胎盘亮氨酸氨肽酶/催产素酶基因的关系”生物化学杂志。

Okuwaki, M. et al.: "Function of nucleophosmin/B23, a nucleolar acidic protein, as a histone chaperone"FEBS Letters. 506. 272-276 (2001)

Okuwaki, M. 等人：“核磷蛋白/B23（一种核仁酸性蛋白，作为组蛋白伴侣）的功能”FEBS Letters。