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細胞周期調節に関与するRNA結合蛋白質の解析

参与细胞周期调节的 RNA 结合蛋白分析

基本信息

批准号：
13043054
负责人：
松本健
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13043054/
关键词：
RNA結合蛋白質翻訳調節細胞増殖細胞周期

项目摘要

動物細胞内ではmRNAはつねに特定の蛋白質との複合体であるmRNPとして存在する。細胞質におけるmRNPの主要RNA結合コンポーネントとしてY-ボックス蛋白質がある。本研究では、Y-ボックス蛋白質がmRNAとどのような複合体を形成して細胞増殖にどのような影響を与えるかを検討した。まず、アフリカツメガエル卵母細胞の貯蔵mRNPを構成するY-ボックス蛋白質であるFRGY2蛋白質とmRNAとを試験管内でインキュベートすると、安定なFRGY2-mRNA複合体の形成が観察された。この複合体をウサギ網状赤血球ライセート無細胞系に添加したところ、その翻訳効率は裸のmRNAに比べて大きく低下していた。また、FRGY2との複合体の形成により、mRNAのRNase感受性が低下することがわかった。これらの結果は、このFRGY2-mRNA複合体は、FRGY2によってmRNAがパッケージされたものであり、母性mRNAを卵母細胞内で翻訳させずに安定に長期間保存するという貯蔵mRNPの機能を再現するものであることを示している。一方、体細胞でのY-ボックス蛋白質の機能を探るため、トリDT40細胞でのY-ボックス蛋白質(YB1)遺伝子破壊株を作成した。YB1蛋白質はDT40細胞抽出液中でmRNPおよびpolysome画分に検出され、翻訳調節への関与が予想された。このYB1遺伝子破壊株では、野生株に比べて細胞増殖速度の低下、および蛋白質合成能の低下が認められたが、細胞周期の特定の時期の遅延は観察されなかった。この結果は、YB1蛋白質が翻訳調節を介して細胞増殖に重要な役割を果たしていることを示唆する。

The animal is intracellular, mRNA, specific, protein-specific, complex, mRNP, and present. The main RNA of the cell cycle was mRNP. The protein was purified by the combination of protein and protein. In this study, we studied the formation of the complex of mRNA protein and Y-DNA in this study. The oocytes, oocytes, mRNP cells, oocytes, o The number of clones of red blood cells and red blood cells in the cell line was lower than that in the cell line. The percentage of naked mRNA was lower than that of normal cells. The complex of FRGY2 and FRGY2 forms the virus, and the RNase susceptibility of FRGY2 is low. The results of the experiments, the results of the FRGY2-mRNA complex, the FRGY2 copy, the mRNA and the maternal mRNA oocytes were analyzed, and the long-term preservation of the stability and stability of the maternal mRNA oocytes was confirmed. The mRNP machine was able to detect the negative effects. On the one hand, the whole body cell can be used to detect the protein protein, and the DT40 cell can be made by breaking the strain of protein protein (YB1). YB1 protein "DT40" cell extract, "mRNP" and "polysome" were divided into three parts: "draw", "flip" and "imagine". The cell colonization rate of the wild strain was lower than that of the wild strain, the cell proliferation rate of the wild strain was lower than that of the wild strain, the cell growth rate of the wild strain was lower than that of the wild strain, and the synthesis of YB1 protein was able to detect the cell cycle at a specific time point in the cell cycle. The results showed that the results of YB1 protein analysis showed that the cell colonization was very important.