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細胞周期調節に関与するRNA結合蛋白質の解析

参与细胞周期调节的 RNA 结合蛋白分析

基本信息

批准号：
14033253
负责人：
松本健
金额：
$ 3.07万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

Xenopus cold-inducible RNA-binding protein2(xCIRP2)はアフリカツメガエルの卵母細胞に存在する主要なRNA結合蛋白質の一つである。ホモログの解析から、発生の正常な進行に重要であることが示唆されているが、その分子機能は明らかにされていなかった。マウスCIRPは高発現により細胞にG1期遅延を引き起こすことが知られている。我々は酵母two-hybrid screeningにより、xCIRP2と相互作用する蛋白質としてELAV(embryonic lethal abnormal vision)familyのRNA結合蛋白質elrAをみいだした。elrAのヒトホモログであるHuRはサイトカイン等のmRNAの3'UTRに存在するAU-rich element(ARE)に特異的に結合する蛋白質であり、mRNAの安定化に関与していることが知られている。そこで我々はHeLa細胞の抽出液を用いたin vitro RNA degradation assayにより、mRNAの安定性制御におけるxCIRP2の効果を検討した。その結果、xCIRP2がAREをもつmRNAのpoly(A)鎖分解を抑制することを新たに見いだした。また卵母細胞内でxCIRP2と結合しているmRNAを検索し、いくつかのmRNAを同定した。これらには中心体に存在する蛋白質リン酸化酵素Nek2Bや、サイクリンB1のmRNAが含まれていた。Nek2B mRNAについては、in vitro RNA degradation assayにおいてAREをもつmRNAと同様に、xCIRP2によってpoly(A)鎖分解が抑制されることがわかった。これらの結果から、xCIRP2はpoly(A)鎖長を制御することで、特異的なmRNAの翻訳もしくは安定性を制御している可能性が示された。

Xenopus cold-inducible RNA-binding protein2(xCIRP2) is a major RNA-binding protein present in oocytes. It is important to analyze and develop the normal process of molecular function. CIRP is a high level of cell growth. We also found that the yeast two-hybrid screening protein, xCIRP2, interacts with the ELAV(embryonic lethal abnormal vision)family of RNA-binding proteins elrA. ElrA is a protein that binds specifically to the AU-rich element(ARE) in the 3'UTR of mRNA, such as mRNA, and is known to be involved in mRNA stabilization. We also investigated the effects of xCIRP2 in vitro RNA degradation assay and mRNA stability control in HeLa cell extracts. As a result, xCIRP2 was found to be a novel inhibitor of mRNA poly(A) lock decomposition. XCIRP2 mRNA binding in oocytes The protein kinase Nek2B and mRNA of the protein kinase B1 are present in the centrosome. Nek2B mRNA in vitro RNA degradation assay in vitro. The results show that xCIRP2 can inhibit poly(A) lock length, and the stability of specific mRNA can be inhibited.