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薬剤投与による神経回路の可視化

通过给药实现神经回路的可视化

基本信息

批准号：
20650051
负责人：
山口瞬
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20650051/
关键词：
可視化神経回路テトラサイクリン蛍光蛋白質

项目摘要

脳は様々な機能を備えているが、それぞれの機能は特定の神経回路の働きによると考えられている。しかしながら、これまで特定の脳機能に関わる神経回路を同定することは困難であった。種々の脳機能では、特定の神経回路が働くと同時に、その神経回路を構成する神経細胞で即時型遺伝子(immediate-early gene)の誘導が見られる。このような遺伝子の発現変化を、薬剤投与を引き金として増幅し、明瞭に可視化する手法の開発を目指した。既にテトラサイクリン投与により遺伝子発現の変化を増幅する手法を開発しており、今年度は増幅した変化を蛍光蛋白質で可視化する方法の開発を行った。われわれは既にArc-dVenusマウス(即時型遺伝子の一つArc遺伝子のプロモーター制御下で分解促進型蛍光蛋白質dVenusが発現するトランスジェニックマウス)を作製している。新たに、Arc-dVenusマウスのコンストラクトにさらにArc遺伝子の非翻訳領域を付け加えた遺伝子を持つトランスジェニックマウスを作製した。このマウスを解析し、Arc-dVenusマウスと比較した結果、dVenusをコードするmRNAの半減期が著明に短縮していること、さらにdVenusが誘導されることによって生じる蛍光の増強も、より迅速かつよりシャープなピークを示すことが明らかになった。Arc遺伝子の非翻訳領域をレポーターに付加することで、よりリアルタイムに近い遺伝子発現の変化を観察できると考えられる。テトラサイクリン投与により遺伝子発現の変化を増幅する手法と組み合わせることで、活性化した神経回路を可視化し、リアルタイムに観察する優れた方法となるであろう。

The function of the reverse is to prepare for the function of the reverse is to prepare for the function of the reverse. It is difficult to determine the identity of the neural loop associated with a particular function. The induction of immediate-early genes in neurons that function as seed cells and that are composed of specific neural circuits is also observed. The development of the technology of the development of the technology of the The development of methods for increasing the amplitude of protein production in the context of protein production and protein visualization in the context of protein production The Arc-dVenus protein is produced under the control of the decomposition promoting photoprotein dVenus. New, Arc-dVenus, Arc-dVenus The results of this analysis, Arc-dVenus comparison, dVenus mRNA half-life shortening, dVenus induction, enhancement of light intensity, rapid change of expression. The Arc gene is a non-inverted domain, and the evolution of the gene is observed. The method of increasing the amplitude of the gene expression and the activation of the gene expression is to visualize the gene expression and the gene expression.