Strukturelle Charakterisierung und Aufklärung molekularer Mechanismen von Enzymen der sulfatabhängigen Signalvermittlung

本文主要研究了人酪氨酸蛋白磺基转移酶（TPST）和PAPS合成酶（PAPSS）的功能和结构特征，并通过分子生物学技术对酶的结构进行了研究。在建立一个有效的表达系统和重组蛋白质的基础上，开始韦尔登的同位素标记（13 C，15 N）和TPSTs和PAPSS的非放射性酶制剂的开发。酶的生物化学和物理特性的定量分析平行于结构分析和底物分子和抑制剂对原子能的影响，从而提高韦尔登。

Ziel unserer Arbeit ist die funktionelle und strukturelle Charakterisierung der humanen sulfatübertragenden Enzyme Tyrosylprotein Sulfotransferase (TPST) und PAPS-Synthetase (PAPSS) durch den Einsatz verschiedener molekular- und zellbiologischer Techniken sowie die Strukturaufklärung beider Enzyme oder einzelner Domänen mit Hilfe der multi-dimensionalen NMR. Nach Aufbau eines effizienten Expressionssystems und Reinigungsverfahrens für die genannten Proteine, soll mit der Entwicklung eines nicht radioaktiven Enzymassays für TPSTs und PAPSS und der Isotopenmarkierung (13C, 15N) der Enzyme begonnen werden. Die Quantifizierung der biochemischen und physikalischen Eigenschaften der Enzyme soll parallel zur Strukturaufklärung untersucht und der Einfluß von Substratmolekülen und Inhibitoren auf atomarer Ebene aufgeklärt werden.