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マウス第18番染色体における脳梁欠損症原因遺伝子の発見

发现小鼠 18 号染色体上导致胼胝体缺陷的基因

基本信息

批准号：
21650086
负责人：
杉山文博
金额：
$ 1.98万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21650086/
关键词：
脳梁欠損突然変異遺伝子改変マウス FISH 第18番染色体 TASマウス責任遺伝子

项目摘要

1.FISHによる外来遺伝子染色体挿入領域の決定と候補遺伝子同定現在までの研究において脳梁欠損遺伝子導入マウス(TASマウス)における外来遺伝子は第18染色体9.6～16.9Mbの間に挿入されていることが示された。a)内在ゲノム配列と外来遺伝子との相対な位置関係のInterphase染色体FISH解析Metaphase染色体ではさらなる絞り込みは困難なため、Interphase染色体を用い、外来遺伝子と内在性ゲノム配列をプローブとしたマルチカラーFISHにより挿入部位の絞り込みを実施した。結果、外来遺伝子は第18染色体11.1～12.9Mbの間に挿入されている可能性が示され、この領域にはCables1遺伝子のみが存在することが明らかとなった。b)TASマウスの脳における候補遺伝子の発現解析RT-PCR解析にてTASマウスの脳におけるCables1全長の遺伝子発現は観察されなかったが、市販されているCables1抗体を用いたウエスターン解析では発現が確認され、遺伝子発現と蛋白発現に矛盾が生じた。2.脳梁欠損候補遺伝子KOマウスの作製Cables1を欠損するES細胞をTbxas A&M Institute for Genomic Medicineより入手し、KOマウス作製を行ったが、Cables1 KOマウスは得られなかった。本研究において、脳梁欠損機構にCables1が関わる可能性がゲノムレベルで示唆されたが、今後Cables1 KOマウスを作製し、脳梁欠損機構について詳細に解析を進めることが必要があることが明らかとなった。

1. FISH荧光检测外来精子色素体制备入胞区域染色确定荧光子同确定荧光在荧光研究中的荧光标记形式荧光抗体（TAS荧光标记）荧光检测外来精子色素体第18号色素体9.6~16.9Mb荧光标记制备入胞标记形式荧光显示荧光。a）在中性粒细胞内配列外源荧光子相荧光定位系统中，Interphase染料荧光FISH检测分析中期染料荧光染色申请表中，Interphase染料应用程序中，外源荧光子相在中性粒细胞内配列染料荧光染色申请表中，外源荧光子相荧光FISH检测分析申请表中，准备部分染料荧光染色申请表中的保留义务。苹果，外来光子晶体第18色体11.1~12.9Mb的染料制备成纳米级的可能性显示屏，荧光区域内的荧光Cables1光子晶体中存在的荧光染料显示屏。B）TAS免疫荧光检测试剂盒RT-PCR检测试剂盒TAS免疫荧光检测试剂盒Cables1全自动免疫荧光检测试剂盒示波器检测试剂盒，市售免疫荧光检测试剂盒Cables1抗体用免疫荧光检测试剂盒，免疫荧光检测试剂盒。2.刘梁庆任博士生子KO博士生子制作公司Cables1 Tbxas A&M Institute for Genomic Medicine申请入学，KO博士生子制作公司申请入学，Cables1 KO博士生子制作公司申请入学。本研究将对电缆进行测试，并对电缆1的电缆故障可能性进行测试，显示电缆故障，对电缆1进行KO测试，并对电缆1的电缆故障进行测试，对电缆故障进行分析，并对电缆故障进行必要的排除，以明确电缆故障的原因。