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小脳皮質ニューロンの細胞移動と形態分化のメカニズム

小脑皮质神经元的细胞迁移和形态分化机制

基本信息

批准号：
21300120
负责人：
見学美根子
金额：
$ 12.15万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は生後発生中に明瞭な層構造を形成するマウス小脳皮質をモデルとして、哺乳動物脳の皮質形成のダイナミクスとメカニズムを明らかにすることを目的とする。本年度はニューロン核移動の分子ダイナミクス解析に重点を置き、研究を進めた。昨年度の研究で顆粒細胞移動に影響を与える分子をDiced RNAi法によりSun1,2を同定した。本年度はSun1,2の機能解析を行った。両分子を同時にノックダウンすると核形態に異常を来たし、核移動が有意に阻害されることが明らかになった。現在Sun1,2の機能阻害により核膜構造と核周辺の骨格分子にどのような影響が見られるかを超解像顕微鏡により解析している。また中心体の移動ダイナミクスを明らかにする目的で、光変換型蛍光タンパク質mEos2またはPA-GFPと中心体分子centrin2のキメラ分子を発現させ、中心小体のひとつを照射して吸収光波長を変化させ、ふたつの中心小体の挙動を詳細に比較解析した。その結果、移動ニューロンでは中心小体の母娘間に殆ど優位性の差がないことを示唆する結果を得た。さらに核移動における中心体の機能を直接明らかにするため、移動中の顆粒細胞の中心体をCentrin2-GFPで標識し、二光子レーザー顕微鏡で中心体を破壊した影響を観察する実験系を立ち上げた。中心体を破壊し、細胞に致死的侵襲を与えないレーザー照射条件の設定を行った。今後中心体破壊が核移動および微小管形成にどの様な影響を及ぼすか解析する準備が調った。

This study has clarified the formation of the layer structure of the skin and the structure of the skin after birth. The skin of the breast of the mammal is formed by the skin of the skin. This year, the focus of analysis and research on the molecular structure of nuclear mobile nuclei is set and advanced. Last year's research on the impact of granulosa cell movement was based on the molecular Diced RNAi method based on Sun1,2. This year's functional analysis of Sun1 and 2 is done.両The molecules are at the same time, and the nuclear shape is abnormal, and the nuclear movement is not intentional, and the nuclear movement is hindered. Now the function of Sun1,2 affects the structure of nuclear membrane and the structure of nuclear perinuclear skeletal molecules, and the influence of super-resolution micro-mirror analysis is on. Centrosome の mobile ダイナミクスを明らかにするpurpose で、Photoreplacement type 荍光タンパク plasm mEos2またはPA-GFPとcentrosome molecule centr in2のキメラmolecules are を発appearsさせ, centrosome のひとつをirradiation してabsorbed light wavelength を変化させ, ふたつのcentrosome の挙movable をdetailed comparative analysis した.そのRESULTS, MOVING ニューロンではcentral body のmother-daughter-between に殆ど Superiority の DIFFERENCE がないことをshows instigation するRESULTS をget た.さらに nuclei move におけるcentrosome の function をdirect clarification らかにするため、moving のgranule cells のcentrosome をCentri n2-GFP is labeled, and the two-photon micromirror is used to detect the central body of the n2-GFP. The destruction of centrosomes and the lethal invasion of cells and the setting of irradiation conditions are all possible. From now on, the centrosome is broken, the nucleus is moved, the microtubule is formed, the influence is carried out, and the analysis is carried out, and the preparation is adjusted.