小脳顆粒細胞の形態と移動の極性を司る細胞骨格制御因子の機能解析

控制小脑颗粒细胞形态和迁移极性的细胞骨架调节因子的功能分析

• 批准号: 13780635
• 负责人: 見学 美根子
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13780635/
• 关键词: ニューロン移動; 小脳顆粒細胞; 先導突起; 樹状突起; 接線移動; 放射移動; 軸索; 細胞極性; 中枢神経系ニューロン; 細胞移動; Pax6; 細胞骨格

脊椎動物中枢神経系の複雑な回路網形成には、分裂層で誕生した個々のニューロンが細胞移動して正しく配置し、入出力細胞に向かい樹状突起や軸索を発達させることが不可欠である。本研究では、発生中直角な方向転換を挟み、接線移動と放射移動を連続して経験する小脳顆粒細胞をモデルとして、中枢神経系ニューロンの移動と形態の極性を制御する分子機構を明らかにすることを目指した。昨年度までに、転写因子Pax6が顆粒細胞の双極性軸索の伸長と軸索内の細胞移動を司る細胞骨格編成機構の上流にあることを明らかにし、野生型とPax6変異顆粒細胞で差次的に発現する複数の分子をdifferential display法で単離した。これらのうち特に細胞骨格編成に直接関与しうる細胞内シグナル伝達因子に注目して、顆粒細胞の移動と形態の極性調節に関与する細胞骨格編成分子の同定を試みた。顆粒細胞の二相性の極性移動を再構成できる組織片培養系を用い、阻害剤の添加や分子の強制発現を行った結果、Ca依存型PKCの活性を阻害した顆粒細胞で接線移動の速度が有意に減少し、Ca依存型PKCが顆粒細胞の接線移動の制御に関与する事が明らかになった。また培養下の顆粒細胞にGFPを強制発現させ、移動のダイナミクスをタイムラプス共焦点顕微鏡で詳細に追跡した。その結果、顆粒細胞の二相性の移動は、各々将来軸索と樹状突起に分化する性質の異なる先導突起に導かれて起ることが明らかになった。

Vertebrate central 経 god is の complex 雑 な back road network formation に は, divided layer で born し た a 々 の ニ ュ ー ロ ン が cellular mobile し て is し く configuration し, into the output cell に か い dendritic protrusions や axon を 発 da さ せ る こ と が not owe で あ る. This study で は, 発 born in rectangular な direction planning in を carry み, connection mobile と radiation mobile を even 続 し て 経 験 す る small 脳 granulosa cells を モ デ ル と し て, central department of god 経 ニ ュ ー ロ ン の mobile と polarity の form を suppression す る molecular institutions を Ming ら か に す る こ と を refers し た. Yesterday's annual ま で に, planning to write factor Pax6 が granulosa cells の bipolar axon の elongation と axon mobile を department る の cells within the bone into institutions の upper に あ る こ と を Ming ら か に し, wild type と Pax6 - different granular cell で sent time に 発 now す る plural の molecular を differential display method で 単 from し た. こ れ ら の う ち に cell bone into に masato directly with し う る intracellular シ グ ナ ル 伝 of factor に attention し て, granular cell の mobile と polarity の form adjustment に masato and す る cells bone into molecular の be を try み た. Granular cell の two-phase sex の polarity を again moving で き る tissue slice culture system を い, resistance against tonic の add や molecular の forced 発 line now を っ た results, Ca dependent type PKC activity の を resistance against し た granulosa cells で connection speed of mobile の が intentionally に reducing し, Ca dependent type PKC が granulosa cells の wiring mobile の suppression に masato and す る matter が Ming ら か に な Youdaoplaceholder0. ま た fostering の granulosa cells に GFP を forced 発 now さ せ, mobile の ダ イ ナ ミ ク ス を タ イ ム ラ プ ス total focus 顕 micromirror で detailed に tracing し た. そ の results, granular cell の two-phase の mobile は, each 々 future axon と dendritic protrusions に differentiation す る nature の different な る pilot protrusions に guide か れ て up る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

Yamasaki, Takao: "Pa x6 regulates granule cell polarization during parallel fiber formation in the developing cerebellum"Development. 128. 3133-3144 (2001)

Yamasaki, Takao：“Pa x6 在发育中小脑平行纤维形成过程中调节颗粒细胞极化”开发。

Eiraku, Mototsugu: "Delta/Notch-like EGF-related Receptor, a novel EGF-like repeat-containing protein targeted to dendrites of developing and adult central nervous system neurons"Journal of Biological Chemistry. 277. 25400-25407 (2002)

Eiraku、Mototsugu：“Delta/Notch 样 EGF 相关受体，一种新型 EGF 样重复序列蛋白，靶向发育中和成年中枢神经系统神经元的树突”生物化学杂志。

Minami, Itsunari: "Long term potentiation of mGluR1 activity by depolarization-induced Homerla in cerebellar Purkinje neurons"European Journal of Neuroscience. (発表予定). (2003)

Minami，Itsunari：“小脑浦肯野神经元中去极化诱导的 Homerla 的 mGluR1 活性的长期增强”《欧洲神经科学杂志》（即将出版）。