還元酵素を必要とする小胞体関連分解の解明

阐明需要还原酶的内质网相关降解

• 批准号: 10J07966
• 负责人: 潮田 亮
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto Sangyo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J07966/
• 关键词: 小胞体関連分解; 小胞体品質管理; レドックス

我々は正常タンパク質と異常タンパク質を各々が持つ糖鎖構造の差異で区別するレクチンタンパク質EDEMをクローニングし(N.Hosokawa et al.EMBO Reports,2001)、ERADにおける異常タンパク質識別メカニズムの解明に大きく寄与した(Y.Oda et al. Science, 2003)。しかし、異常タンパク質の識別からサイトゾルへの逆行輸送メカニズムに関しては不明な点が多いのが現状であった。我々はEDEMと相互作用するタンパク質を検索することで、EDEMによる異常タンパク質の認識および認識以降のメカニズムを解明することを目的とした。ER MYTHS(ER Membrane Yeast Two-Hybrid System)という新規Yeast Two-Hybrid法を採用し、EDEMとERdj5との結合を見出した。ERdj5はJドメインと4つのチオレドキシン様ドメインを有しており、ERdjファミリーとチオレドキシンファミリーに属している。我々はリコンビナントERdj5の精製に成功し、in vitroにおける酸化還元活性を測定した結果、ERdj5は小胞体タンパク質では初めて還元活性に特化した還元酵素であるということがわかった。さらに哺乳類細胞を用いた実験で、ERdj5はEDEMが認識した分解基質のジスルフィド結合を還元活性で解離し、分解を促進することを見出した。酸化的小胞体環境で基質の立体構造を解くというプロセスは非常に興味深く、世界的にも大きなインパクトを与えた(R.Ushioda et al.Science 2008)。また、我々は九州大学の稲葉謙次准教授との共同研究でERdj5の結晶構造を解くことに成功し、ERdj5分子内の詳細なドメイン解析にも成功している(M.Hagiwara et al.Mol.Cell 2011)。

There is a difference between the normal and abnormal properties of the sugar lock and the structure of the sugar lock. N.Hosokawa et al. EMBO Reports, 2001), ERAD Abnormal Quality Identification System (Y. Oda et al. Science, 2003).しかし、Abnormal タンパクquality identification からサイトゾルへのretrograde transmission Send the メカニズムに关してはunknownなPointが多いのがcurrent situationであった.我々はEDEMとinteractionするタンパク性を検SOすることで、EDEMによるdifferent The knowledge of the nature of the nature is the knowledge of the nature, and the knowledge of the nature is the meaning of the knowledge. ER MYTHS (ER Membrane Yeast Two-Hybrid System) adopts the new Yeast Two-Hybrid method, and EDEM combines it with ERdj5. ERdj5はJドメインと4つのチオレドキシン様ドメインを有しており、ERdjファミリーとチオレドキシンファミリーに genus している. I have successfully refined the details of ERdj5, in In vitro acidification and reduction activity measurement results, ERdj5 small cell body test resultsパク性ではInitially めて Reduction activity にSpecialized したReduction enzyme であるということがわかった.さらにMammalian cellsを Useいた実験で、ERdj5はEDEMがKnowledgeしたdegradation base The combination of quality, activity, dissociation, and decomposition promotion, see out. The acidified small cell environment and the three-dimensional structure of the matrix are very interesting, and the world's large and small cells are very strong (R. Ushioda et al. Science 2008).また, I, and I, Associate Professor Kenji Ine from Kyushu University, jointly researched the solution to the crystal structure of ERdj5. Success, ERdj5 intramolecular detailed analysis of success (M.Hagiwara et al. Mol. Cell 2011).

项目成果

The Endoplasmic Reticulum-Associated Degradation and Disulfide Reductase ERdj5.

内质网相关降解和二硫键还原酶 ERdj5。

• 发表时间: 2011
• 期刊: Methods Enzymol.
• 作者: Shiho Hagiwara;Koh Yamanaga;Ryo Takahashi;Kazuya Masu;Takashi Sato;R.Ushioda
• 通讯作者: R.Ushioda

Two distinct pathways for recruitment of misfolded proteins to ERdj5.

将错误折叠蛋白招募到 ERdj5 的两种不同途径。

• 发表时间: 2010
• 作者: 萩原汐;伊達貴徳;上薗巧;佐藤高史;益一哉;M.Hagiwara;Ryo Ushioda;R.Ushioda
• 通讯作者: R.Ushioda

The Endoplasmic Reticulum-Associated Degradation and Disulfide Reductase ERdj5

内质网相关降解和二硫键还原酶 ERdj5

• 发表时间: 2011
• 期刊: Methods Enzymol
• 作者: Yamashita;Rika;Ryo Ushioda
• 通讯作者: Ryo Ushioda

Non-glycoprotein ERAD pathway serves as a backup system under ER stress.

非糖蛋白 ERAD 通路在 ER 应激下充当备用系统。

• 发表时间: 2011
• 作者: Ryo Ushioda;Jun Hoseki and Kazuhiro Nagata
• 通讯作者: Jun Hoseki and Kazuhiro Nagata

Structural Basis of an ERAD Pathway Mediated by the ER-Resident Protein Disulfide Reductase ERdj5

• DOI: 10.1016/j.molcel.2011.01.021
• 发表时间: 2011-02-18
• 期刊: MOLECULAR CELL
• 影响因子: 16
• 作者: Hagiwara, Masatoshi;Maegawa, Ken-ichi;Inaba, Kenji
• 通讯作者: Inaba, Kenji