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DNA依存性プロテインキナーゼからのアプローチによるがん温熱療法の基礎研究

使用DNA依赖性蛋白激酶方法进行癌症热疗的基础研究

基本信息

批准号：
11770496
负责人：
松本義久
金额：
$ 1.34万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

温熱の放射線増感作用とDNA依存性プロテインキナーゼ(DNA-PK)の温熱不安定性の関係を探るアプローチの一つとして、DNA-PKcs(触媒サブユニット)またはKuサブユニットを欠損するほ乳類培養細胞を用いた検討を行った。欠損細胞においても温熱処理による放射線感受性の増強は認められたが、放射線単独に対する感受性が非常に高いため対照細胞との比較が難しく、結論を下すにはより詳細な検討を行う必要があると考えられた。また、温熱単独処理に対する感受性の検討も同時に行った。近年、DNA-PKのサブユニットを欠損する細胞が温熱高感受性を示すという結果をいくつかの他グループが発表しているが、本研究の結果は必ずしもこれらと一致しなかった。これまで、DNA-PKの細胞内の基質が明らかになっておらず、in situでのDNA-PK活性を評価する方法がなかった。私は、DNA ligase IVと複合体を形成し、DNA二重鎖切断修復に関与すると考えられているXRCC4タンパク質に着目し、SDS-PAGE-Western法で解析した。その結果、X線照射によって誘導されるXRCC4のリン酸化にDNA-PKcsが必要(一方、ATMは不要)であることが分かり、XRCC4がDNA-PKの細胞内での基質(の1つ)になっている可能性が示された(FEBS Lett.,2000)。この結果から、XRCC4のリン酸化を指標として、DNA-PK活性に対する温熱処理の影響をin situで調べることが可能になると期待される。

The relationship between thermal radiation sensitization and DNA-dependent protein kinase (DNA-PK) and thermal instability was explored. The radiation sensitivity of the damaged cells is very high. The radiation sensitivity of the damaged cells is very high. The sensitivity of heat treatment alone is discussed simultaneously. In recent years, DNA-PK has been shown to be hypersensitive to heat in cells with insufficient damage. The results of this study are consistent with those of other studies. Methods for evaluating the activity of DNA-PK in situ and in vivo DNA ligase IV complex formation, DNA double-lock repair and analysis by SDS-PAGE-Western Results, X-ray irradiation induced XRCC4 DNA acidification, DNA-PKcs necessary (one side, ATM does not), XRCC4 DNA PK intracellular matrix (one side), DNA-PKcs possible (FEBS Lett., 2000)。These results indicate that the activity of XRCC4 is related to the effect of heat treatment on the activity of DNA-PK.