虚血後神経細胞保護のためのアポEータウ因子/融合蛋白によるミサイル療法の開発

使用apoE-tau因子/融合蛋白开发用于缺血后神经元细胞保护的导弹疗法

• 批准号: 21659343
• 负责人: 森岡 基浩
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659343/
• 关键词: タウ因子; リン酸化反応; 脳虚血; アポE; 融合蛋白

I)既に作成したヒトApoE遺伝子に対し1)タウのリン酸化部位を脱リン酸化型としたhTAU40d(既に作成済み)と更に追加して2)上記に加え141,307,324番目セリン、173番目スレオニンを更にアラニンに変換し、細胞死抑制効果の高いことが期待される新たなhTAU40d-2を作製した。上記2遺伝子を、発現ベクターpSMRTac-3Nに組み込みE.Coli;10GF ELITEにtransformationを行った。IPTGにによるタンパク質合成誘導しSoftagアガロース結合型抗体カラムにて蛋白精製を行った。hTAU40dは既に作成済みであり蛋白作成は可能であったが、hTAU40d-2は蛋白発現、精製の効率が容易でなく時間を要していたが少量ずつ作成し培養神経系細胞に投与し神経細胞死の抑制実験を行っている。時点ではhTAU40d-2の方が神経細胞死抑制効果は高い傾向となっている。II)本研究はTAT-配列をN-端側に融合させ脳室から髄液内に投与する事でその細胞内移行の効率化を図っているが、臨床の局面においては髄腔内投与には侵襲を伴う事から蛋白の脳内導入を効率よく行う方法の開発を同時に行った。Rat内頸動脈からの動脈内注入法を確立すべく ラット用カテーテルを作成し外頸動脈から内頸動脈へ導入し再現性よく蛋白の注入が出来る方法を開発、脳虚血状態の評価として脳血流量を再現性よくin vivoで測定を行うことを可能とするため経頭蓋赤外線ドップラー法を確立させた。上記の成果からhTAU40d,hTAU40d-2を同程度の脳虚血状態下で動脈内注入を行い神経細胞死抑制実験を行う。

I) both に made し た ヒ ト traces of ApoE 伝 son に し 1) seaborne タ ウ の リ ン acidification parts を リ off type ン acidification と し た hTAU40d (both に made 済 み) と に more additional し て 2) written に え's 141307324 mesh セ リ ン, 173's mesh ス レ オ ニ ン を more に ア ラ ニ ン に variations in し, cells die suppression working high の い こ Youdaoplaceholder0 is looking forward to the される new たなhTAU40d-2を being produced by た. Note 2: 伝 offspring を, occurrence of ベ タ 伝 pSMRTac-3Nに group み込みE. coli; 10GF ELITEにtransformationを lines った. IPTGにによるタ アガロ パ パ amyloid synthesis induces the refinement of the カラムにて protein of the アガロ ス binding antibody カラムにて を and った. HTAU40d は に already done 済 み で あ り protein made は may で あ っ た が, hTAU40d - 2 protein は 発 now, refined の sharper rate が easy で な く time を し て い た が small ず つ made し cultivate god 経 cell に 経 cells die cast and し god の inhibit be 験 を line っ て い る. At the time point で で hTAU40d-2 <s:1>, the inhibitory effect on the death of が neural cells has a <s:1> high <s:1> tendency となって る る. II) this study は TAT - match column を N - end side に fusion さ せ 脳 chamber か ら に shot within marrow fluid and す る matter で そ の cells migration の sharper rate change を 図 っ て い る が situation, clinical の に お い て は cast with marrow cavity に は invade を companion う matter か ら protein の 脳 import を sharper rate よ く line う method の open 発 を line at the same time に っ た. Rat internal jugular artery か ら の を arterial injection method to establish す べ く ラ ッ ト with カ テ ー テ ル を し consummate external carotid artery か ら へ parent internal carotid artery import し reproducibility よ く protein の injection が method る を 発, 脳 virtual state of blood の review 価 と し て 脳 blood flow を reproducibility よ く in vivoで determination of を line う う とを may とするため establish させた through the cover infrared line ドップラ を method を. The results of the above record are らhTAU40d and htau40D-2 を. Under the same degree of <s:1> 脳 deficiency blood state, を is injected into the で artery for the inhibition of <s:1> neural cell death を.

项目成果

3-dimensional computed tomographic procedure for planning retromastoid craniotomy

用于规划乳突后开颅手术的 3 维计算机断层扫描程序

• 发表时间: 2009
• 期刊: Neurosurgery. 64
• 作者: Hamasaki T.;Morioka M;et al.
• 通讯作者: et al.

Deficits in Japanese word spelling as an initial language symptom of malignant glioma in the left hemisphere.

日语单词拼写缺陷是左半球恶性神经胶质瘤的初始语言症状。

• 发表时间: 2009
• 期刊: Surg Neurol. 71
• 作者: Maeda T;Morioka M;et al.
• 通讯作者: et al.

もやもや病における脳梗塞発症に関与する因子の解析

烟雾病脑梗塞发病相关因素分析

• 发表时间: 2010
• 作者: Maeda T;Morioka M;et al.;森岡基浩
• 通讯作者: 森岡基浩

Memory impaierment due to a small unilateral infarction of fornix

单侧穹窿小梗塞导致记忆障碍

• 发表时间: 2010
• 期刊: Clin.Neurol Neurosurg
• 作者: K.Korematsu;M.Morioka;et al
• 通讯作者: et al

Ruptured aneurysm at an anastomotic artery extending from the vertebral artery to the posterior inferior artery

从椎动脉延伸到后下动脉的吻合动脉处的动脉瘤破裂

• 发表时间: 2011
• 期刊: Acta Neurochir (Wien)
• 作者: J.Matsumoto;M Morioka;et al.
• 通讯作者: et al.