课题基金 / 基金详情

生細胞でのリン酸化反応の可視化技術の開発

生細胞でのリン酸化反応の可視化技術の開発
活细胞磷酸化反应可视化技术的开发
批准号：
20657039
负责人：
稲垣 昌樹
金额：
$2.18万
依托单位：
Aichi Cancer Center Research Institute
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2008 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20657039/
关键词：
リン酸化反応抗リン酸化ペプチド抗体抗体遺伝子細胞内反応可視化

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本研究では、まず、ビメンチンリン酸化抗体可変領域の遺伝子を単離同定し、オープンサンドウィッチイライザ実験系を確立した。次に、従来のリコンビナント抗体発現法に従って、リン酸化抗体可変領域を哺乳類細胞に発現させてみたが、リン酸化ビメンチンを特異的に認識しなかった。そこで、可変領域をタンパク質発現・精製し、哺乳類細胞に導入することを試みることにした。そのために、抗体のラペル方法とタンパク質細胞導入法を確立した。今後、可変領域変異クローンライブラリーからオープンサンドウィッチイライザ実験系を用いて計測した抗原特異的結合性をもとに、細胞内導入時に機能する可変領域配列を決定する予定である。また、リン酸化反応を可視化するための方法として、嫌気性細菌由来蛍光蛋白質を用いた蛋白質相互作用検出法であるプロテイン・コンプレメンテーション解析法を計画している。まず、この嫌気性細菌由来蛍光蛋白質を哺乳類細胞で発現させた。細胞株によっては、この嫌気性細菌由来蛍光蛋白質を発現させると、細胞のダメージが大きく、発現量が非常に少なかった。しかし、汎用性の高い2細胞株について、細胞のダメージは認められず、強い蛍光が観察された。現在、従来法のプロテイン・コンプレメンテーション解析法に用いている蛍光蛋白質切断箇所と比較して予想される切断場所で、本研究に用いている嫌気性細菌由来蛍光蛋白質を分断し、この解析法に用いることが可能か、試している。
期刊论文(1)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Novel TPHD proteins : keratin-binding proteins act as the regulator for the cell-cell adhesion
新型 TPHD 蛋白：角蛋白结合蛋白充当细胞间粘附的调节剂
DOI： --
发表时间： 2008
期刊：
影响因子： --
作者： [Inoko, A., Inagaki M.]
通讯作者： Inagaki M.
Protein phosphatase 4 catalytic subunit regulates Cdk1 activity and microtubule organization via NDEL1 dephosphorylation.
DOI： 10.1083/jcb.200705148
发表时间： 2008-03-24
期刊： JOURNAL OF CELL BIOLOGY
影响因子： 7.8
作者： [Toyo-oka, Kazuhito, Mori, Daisuke, Yano, Yoshihisa, Shiota, Masayuki, Iwao, Hiroshi, Goto, Hidemasa, Inagaki, Masaki, Hiraiwa, Noriko, Muramatsu, Masami, Wynshaw-Boris, Anthony, Yoshiki, Atsushi, Hirotsune, Shinji]
通讯作者： Hirotsune, Shinji
The keratin-binding protein Albatross regulates polarization of epithelial cells.
角蛋白结合蛋白信天翁调节上皮细胞的极化。
DOI： 10.1083/jcb.200803133
发表时间： 2008-10-06
期刊： The Journal of cell biology
影响因子： --
作者： [Sugimoto M, Inoko A, Shiromizu T, Nakayama M, Zou P, Yonemura S, Hayashi Y, Izawa I, Sasoh M, Uji Y, Kaibuchi K, Kiyono T, Inagaki M]
通讯作者： Inagaki M
Palmitoylation of ERBIN is required for its plasma membrane localization
DOI： 10.1111/j.1365-2443.2008.01198.x
发表时间： 2008-07-01
期刊： GENES TO CELLS
影响因子： 2.1
作者： [Izawa, Ichiro, Nishizawa, Miwako, Inagaki, Masaki]
通讯作者： Inagaki, Masaki
Primary cilia-mediated signaling for cell growth and differentiation
  • 批准号：
    21H02696
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.15万
  • 财政年份：
    2021
  • 负责人：
    稲垣 昌樹
  • 依托单位：
    Mie University
染色体不安定性における分裂期キナーゼ群間のクロストーク機構の解明
  • 批准号：
    18012055
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $7.3万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    稲垣 昌樹
  • 依托单位：
    Aichi Cancer Center Research Institute
癌浸潤・転移における中間径フィラメント蛋白質の役割解明
  • 批准号：
    12215170
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
  • 资助金额：
    $2.82万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    稲垣 昌樹
  • 依托单位：
    Aichi Cancer Center Research Institute
各種キナーゼの活性化状態を可視化するシステムの開発
  • 批准号：
    12878119
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $1.34万
  • 财政年份：
    2000
  • 负责人：
    稲垣 昌樹
  • 依托单位：
    Aichi Cancer Center Research Institute
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