Der molekulare GTPase-Mechanismus von H-ras p21 bestimmt mit zeitaufgelöster FTIR-Spektroskopie

Komplementär zu den Röntgenstrukturanalysen soll zum Verständnis des Molekularen Reaktionsmechismus GTP-Bindender Proteine am Ras MIT zeitaufelöster FTIR-Spektroskopie beigetragen.MIT Hilfe des von uns neu etableerten metodischen Ansat Konnte gezeigt Wed，dass die the GTP-Bindung an RAS否定Ladungen von g-nach b-Phocat verschiebt.国内生产总值和国内生产总值中的GTP中都有Ladungen的损失，GTP/GDP中的GTP和GTP中的GTP是一致的。Durch Gap-Bindung wird Dieser Effekt noch erheblich verstärkt.在这两种情况下，我们都能从“P-环”的“P-环路”中找到一种新的工业磷酸。他说：“这是一件非常重要的事情。我们知道这是一件很重要的事情，但这是一件很重要的事情，因为这是一件很重要的事情。在Künftigen arbeiten soll bstimt，ob dabein in DEM intermediat der RasGAP Proteinkplex in Ras GAP Proteinkplex in Ras GAP Proteinkplex.我们做了两个实验，一个是蛋白质结合，一个是蛋白质结合。Zudem soll die RAS-Raf-Kinase交互作用。

Komplementär zu den Röntgenstrukturanalysen soll zum Verständnis des molekularen Reaktionsmechanismus GTP-bindender Proteine am Beispiel des Ras mit zeitaufgelöster FTIR- Spektroskopie beigetragen werden. Mit Hilfe des von uns neu etablierten methodischen Ansatzes konnte gezeigt werden, dass die GTP-Bindung an Ras negative Ladungen von g- nach b-Phosphat verschiebt. Da die Ladungen bereits in GTP in dieselbe Richtung verschoben werden, wie später beim dissoziativem Übergangszustand und GDP Produktzustand, scheint diese Ladungsverschiebung die freie Aktivierungsenthalpie für den GTP/GDP Übergang zu erniedrigen und somit zur Katalyse der GTPase Reaktion beizutragen. Durch GAP-Bindung wird dieser Effekt noch erheblich verstärkt. In künftigen Arbeiten soll untersucht werden, ob neben dem katalytischen "Arg-Finger" auch Lys-16 und der hoch konservierte "P-Loop" diese Ladungsverschiebung nach b-Phosphat induzieren. Zur Zuordnung sollen insbesondere isotopenmarkierte Aminosäuren eingesetzt werden. Wir konnten weiterhin nachweisen, dass bei der GAP-katalysierten Reaktion das freigesetzte anorganische Phosphat intermediär an den Proteinkomplex gebunden wird und somit die Phosphatfreisetzung der geschwindigkeitsbestimmende Schritt ist. In künftigen Arbeiten soll bestimmt werden, ob dabei in dem Intermediat der RasGAP Proteinkomplexes phosphoryliert wird. Weiterhin soll der experimentelle Ansatz auf andere GTP bindende Proteine übertragen werden. Zudem soll die Ras-Raf-Kinase Interaktion untersucht werden.