細胞内型ホスホリパーゼ(iPLA1)欠損による不妊発症機構の細胞生物学的解析

细胞生物学分析细胞内磷脂酶（iPLA1）缺陷引起不孕症的机制

• 批准号: 22790087
• 负责人: 有光 なぎさ
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22790087/
• 关键词: 欠損マウス; 精子形成; 不妊; ホスホリパーゼ

グリセロリン脂質のsn-1位のエステル結合の加水分解(phospholipase A1活性:PLA1活性)を触媒するiPLA1ファミリー(iPLA1α、β及びγ)の精巣での機能を解明するために3種の遺伝子欠損マウスの作製を行った。現時点ではジャームライントランスミッターが得られたばかりのiPLA1αを除き、iPLA1β及びiPLA1γ欠損マウスの解析を行っている。iPLA1βおよびγ遺伝子欠損マウスは生存可能(1年齢まで解析)であった。精巣での機能解析のための交配実験の結果β欠損オスマウス(6週～24週令)は不妊傾向にあることを見出した。また、受精過程における異常であるか否かについて、欠損オス精子を用いて体外受精実験を行い、その受精率を調べた所、受精後第2極体の放出及び2細胞への卵割を示す割合が少なかった。γ欠損オスマウスでの交配でも産仔数が少ない傾向にあったがβ欠損マウスほど顕著ではなかった。精細胞分化過程での異常の有無を見るため、ヘマトキシリン、エオジン染色を行い、その構造に野生型と差があるかを解析した結果、体外受精率が著しく低いβ欠損マウス精巣において伸長型精子まで分化していなかった。また、精巣上体尾部から採取した精子のPNA染色にてアクロソーム形成を見るとβ欠損マウスはアクロソーム形成不全がおきていた。γ欠損マウスは野生型と組織学的な差がほとんど見られなかった。精細胞でのiPLA1βの発現は核近傍及び核を取り囲むように局在がみられる。核近傍の領域はこれまでの知見より、ゴルジ体から小胞を介してアクロソームの合成が行われている。さらに、iPLA1βが小胞輸送に関わる因子と結合することや、培養細胞内だが、細胞内タンパク質輸送に関わることが示唆されていることから、精子形成過程において重要なタンパク質の細胞内局在に関わるのではないかと考えている。

グリセロリンlipid sn-1 bit のエステル binding の hydrolysis (phospholipase A1 activity: PLA1 activity) catalytic activity iPLA1 ファミリー (iPLA1α, β andびγ) の精巣での Function を 明するために 3 kinds of の缝子 owed to マウスの璒行った. The current point is the same as the current one αを出き, iPLA1β and びiPLA1γ lack the analysis of マウスの行っている. iPLA1βおよびγ remains unaffected by the possibility of survival of Malus (1-year analysis). Analysis of the function of semen swine and mating 実験の result β-loss オスマウス (6 weeks to 24 weeks) and infertility tendency にあることを见出した.また、The fertilization process is abnormal であるか不かについて、The sperm is damaged オスをUse いてIn vitro fertilization実験を行い, the fertilization rate is adjusted, the second polar body is released after fertilization, and the 2 cells are cut, the egg is cut, and the cut is reduced. γ无码オスマウスでのMATCHING でもThe number of litters is small and the tendency is にあったがβ无码マウスほど顕与ではなかった. Sperm cell differentiation process is abnormal, whether it is visible, ヘマトキシリン, エオジン staining, を行い, そのstructure, wild-type とdifferent があThe results of analysis and analysis of in vitro fertilization are low, β-deficient sperm, elongated sperm, and differentiation of sperm.また、PNA staining of したsperm taken from the upper body tail of spermatozoa にてアクロソーム Formation を见るとβ owed マウスはアクロソーム Formation incomplete がおきていた. γ is the result of the loss of wild-type and histological properties of the マウスは and the な difference がほとんど见られなかった. The sperm cells of iPLA1β are found near the nucleus and the nucleus is located in the center of the sperm cell. The field of close proximity is the knowledge of the field, and the body of the body is the small cell.さらに, iPLA1β small cell transport に switch わる factor and binding することや, cultured cells だが, intracellular タンパクstroma transport に switch わることThe process of sperm formation is important.ンパク性の性的综合 in the cell is in に关わるのではないかと卡えている.