内分泌かく乱物質による精子形成不全と協調するタンパク質DJ-1-男性抗不妊薬,不妊マーカーの可能性-

DJ-1，一种与内分泌干扰物引起的精子发生缺陷相配合的蛋白质 -作为男性抗不育药物和不育标志物的可能性-

• 批准号: 13877383
• 负责人: 有賀 寛芳
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13877383/
• 关键词: DJ-1; 癌遺伝子; 受精; 内分泌かく乱物質; プロテアーゼ; アンドロゲン受容体; SUMO-1; 精子形成

1.体細胞での機能DJ-1結合タンパク質として、アンドロゲン受容体(AR)の転写制御因子であるPIASxα、タンパク質のSUMO-1修飾に関与するUbc9,Daxx,HIPK1、p53結合タンパク質p53BP3、新規タンパク質DJBPを同定した.まず、DJ-1はARの負の制御因子であるPIASxαと結合・吸収することでARを活性化するARの正の制御因子であることが明らかとなった。PIASには複数のファミリータンパク質があり、DJ-1は負の活性を有するPIAS3,PIASyとも結合するが、その相互関係は不明である。更に、PIASxαはHepG2などの細胞では逆にARを活性化するが、DJ-1は活性化されたARには作用しない.また、DJ-1はPIASxαと同様にARの負の制御因子であるDJBPも結合・吸収しARを活性化したことより,DJ-1は抑制化型ARの救助因子として機能した.また、DJ-1の機能にはSUMO-1修飾が必要であった.更に,ARの機能発揮には核内ドット状構造への局在が必須と考えらているが,AR機能低下を引きおこす内分泌かく乱物質投与の種類によってはARのこの局在が変動するものと変動しないものがある.これらのいずれにおいてもDJ-1は局在を核,細胞質と変動することから,ARが機能発揮するためには,DJ-1との核内ドット状構造への共局在が必須であることが明らかとなった.2.精子での機能DJ-1は精子頭部に局在する.in vitroでの人工授精実験で,AR機能低下を引きおこす内分泌かく乱物質投与マウスでは受精能が低下し,坑DJ-1血清は正常マウス受精能を抑制した.更に,X線結晶構造解析の結果,DJ-1はプロテアーゼIとの酷似が認められ,事実DJ-1は弱いながらプロテアーゼ活性が存在した.この事より,DJ-1は卵への結合後,プロテアーゼ活性により卵に侵入に関与すると考えられた.

1. Somatic で の function combined with DJ - 1 タ ン パ ク qualitative と し て, ア ン ド ロ ゲ ン by let body (AR) の planning write suppression factor で あ る PIASx alpha, タ ン パ ク qualitative の type 1 modified に masato and す る Ubc9, Daxx, HIPK1, p53, combined with タ ン パ ク p53BP3, new rules タ ン パ ク qualitative DJBP を with し た. ま は AR の ず, DJ - 1 negative の suppression factor で あ る PIASx alpha と combination, suction 収 す る こ と で AR を activeness す る AR の is の suppression factor で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. PIAS に は plural の フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク qualitative が あ は り, DJ - 1 negative の activity を す る PIAS3, PIASy と も combining す る が, そ の mutual masato is unknown は で あ る. More に, PIASx alpha は HepG2 な ど の cells で は inverse に AR を activeness す る が は activeness, DJ - 1 さ れ た AR に は role し な. い ま た, DJ - 1 は PIASx alpha と with others に AR の negative の suppression factor で あ る DJBP も combination, suction 収 し AR を activeness し た こ と よ り, DJ - 1 type AR は inhibition <s:1> rescue factor と て function た た また, DJ-1 <s:1> function に であった SUMO-1 modification が necessary であった. More に, AR の function 発 swing に は intranuclear ド ッ ト structure へ の bureau in が must と え ら て い る が, AR function low を led き お こ す endocrine か く disorderly material cast and の kinds に よ っ て は AR の こ の bureau in が - move す る も の と - move し な い も の が あ る. こ れ ら の い ず れ に お い て は も DJ - 1 bureau in を nuclear, cytoplasmic と variations す る こ と か ら, AR が function 発 swing す る た め に は, DJ - 1 と の intranuclear ド ッ ト structure へ の total bureau in が must で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. 2. Function of sperm で の は DJ - 1 sperm head に bureau in す る. The in vitro で の artificial insemination be 験 で, AR low functioning を lead き お こ す endocrine か く disorderly material cast and マ ウ ス で は fertilization can lower が し, pit DJ - 1 normal serum は マ ウ ス fertilization can suppress し を た. Analytical の more に, X-ray crystal structure as a result, the DJ - 1 は プ ロ テ ア ー ゼ I と の resembles が recognize め ら れ, what be the DJ - 1 は weak い な が ら プ ロ テ ア ー ゼ active が exist し た. こ の matter よ り, DJ - 1 は eggs へ の combination, プ ロ テ ア ー ゼ active に よ り eggs に intrusion に masato and す る と exam え ら れ た.

项目成果

Takahashi, K.: "DJ-1 positively regulates the androgen receptor by impairing the binding of PIASxα to the receptor"J. Biol. Chem.. 276. 37556-37563 (2001)

Takahashi, K.：“DJ-1 通过损害 PIASxα 与受体的结合来正向调节雄激素受体”J. Biol. 276. 37556-37563 (2001)

Fujimoto, M.: "Disruption of MSSP, c-myc single-strand binding protein, leads to embryonic lethality in some homozygous mice"Genes Cells. 6. 1067-1075 (2001)

Fujimoto, M.：“MSSP（c-myc 单链结合蛋白）的破坏会导致一些纯合小鼠的胚胎致死”Genes Cells。

Furusawa, M.: "AMY-1, a c-Myc-binding protein, is localized in the mitochondria of sperm by association with S-AKAP84, an anchor protein of cAMP-dependent protein kinase"J. Biol. Chem.. 276. 36647-36651 (2001)

Furusawa, M.：“AMY-1 是一种 c-Myc 结合蛋白，通过与 S-AKAP84（cAMP 依赖性蛋白激酶的锚定蛋白）结合而定位于精子的线粒体中”J.

Satou, A.: "A novel transrepression pathway of c-Myc-Recruitment of a transcriptional corepressor complex to c-Myc by MM-1, a c-Myc-binding protein"J. Biol. Chem.. 276. 46562-46567 (2001)

Satou, A.：“一种新的 c-Myc 反式抑制途径，通过 MM-1（一种 c-Myc 结合蛋白）将转录辅阻遏物复合物招募到 c-Myc”J.

Taira, T.: "Molecular cloning of human and mouse DJ-1 genes and identification of Sp1-dependent activation of the human DJ-1 promoter"Gene. 263. 285-292 (2001)

Taira, T.：“人类和小鼠 DJ-1 基因的分子克隆以及人类 DJ-1 启动子 Sp1 依赖性激活的鉴定”基因。