化学発癌剤等による精子形成不全と協調するタンパク質DJ-1-男性抗不妊薬の可能性-

DJ-1，一种与化学致癌剂等引起的精子发生缺陷相配合的蛋白质 - 作为男性抗不育药物的可能性 -

• 批准号: 11877397
• 负责人: 有賀 寛芳
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877397/
• 关键词: DJ-1; 精子形成; 癌遺伝子; 転写制御; アンドロゲン受容体; 内分泌かく乱物質; 不妊

1.DJ-1遺伝子の単離とプロモーター解析マウスDJ-1 cDNAをプローブとして、ES細胞ゲノムライブラリーよりゲノムDNAをまずクローニングした。高々21KDaと小さなDJ-1タンパク質であるが、10個以上にあたるエキソンを有するものであった。DJ-1遺伝子発現制御機構の解析のために、転写開始点上流にルシフェラーゼ遺伝子を連結させた各種欠損レポーター遺伝子を作製、培養細胞に導入することでプロモーター解析も既に終了した(Taira et al.投稿中)。2.DJ-1とその結合タンパク質のDJ-1機能への関わりDJ-1をbaitとしたtwo-hybridスクリーニングにより複数のDJ-1結合タンパク質cDNAを単離し、Ubc9,アンドロゲン受容体(AR)インヒビターPIASxa/ARIPS,新規タンパク質3種を同定した.Ubc9によるDJ-1へのSUMO-1付加によりDJ-1は核膜周辺に局在が変動した.DJ-1結合タンパク質として同定したARインヒビターPIASxa./ARIPS,AR,DJ-1との相互関係をAR結合配列をレポーターとしたルシフェラーゼアッセイ,in vitropull-down法,共免疫沈降法で詳細に検討し,DJ-1はPIASxa./ARIPSを吸収することによりARを活性化するARの正因子であることが明らかとなった.3.内分泌かく乱物質,不妊とDJ-1との相関マウスにオルニタゾールなどの内分泌かく乱物質を投与するとオスマウスは不妊となるが,これと平行してDHJ-1が顕著に減少した.また,種々の男性不妊患者の精液中のDJ-1は健常人に比較して顕著に減少していた.これより,DJ-1が精子形成に関与し,男性不妊のターゲットタンパク質である可能性が強く示唆された.

1. Analysis of DJ-1 cDNA and DNA High KDa, low DJ-1, high KDa, low DJ-1, high DJ-1, high DJ DJ-1 gene expression control mechanism analysis and development start point upstream analysis and development link analysis and development of various kinds of defective gene expression control and culture cell introduction (Taira et al.). 2. DJ-1 and its combination of quality DJ-1 functions are related to DJ-1 and its combination of quality cDNA and Ubc9, and its combination of quality receptor (AR) and PIASxa/ARIPS. The new regulation is composed of three kinds of substances: Ubc9, DJ-1, SUMO-1 and DJ-1. The new regulation is composed of three kinds of substances: Ubc9, DJ-1, SUMO-1 and DJ-1. The new regulation is composed of three kinds of substances: Ubc9, DJ-1, SUMO-1 and DJ-1. The new regulation is composed of three kinds of substances: Ubc9, DJ-1, SUMO-1 and SUMO-1. ARIPS, AR, DJ-1 and their interrelationships are discussed in detail in the vitropull-down method and the co-immunoprecipitation method. ARIPS absorption and AR activation of AR positive factors, such as: 3. endocrine disruptors, not pregnant DJ-1 related to it, endocrine disruptors, not pregnant DJ-1 related to it, not pregnant, not pregnant DHJ-1 related to it, not pregnant, not pregnant DHJ-1 related to it, not pregnant DHJ-1 related to it. DJ-1 in semen of non-pregnant men decreased significantly compared with healthy men. DJ-1 is associated with sperm formation and male infertility.

项目成果

Kimura,K.: "c-Myc gene single-strand binding protein-1,MSSP-1,suppresses transcription of a-smooth muscle actin gene in chicken visceral smooth muscle cells" Nucleic Acids Res.26. 2420-2425 (1998)

Kimura,K.：“c-Myc 基因单链结合蛋白-1，MSSP-1，抑制鸡内脏平滑肌细胞中 a-平滑肌肌动蛋白基因的转录”Nucleic Acids Res.26。

Ikuta,T.: "Structural analysis of mouse tenascin-X:Evolutionary aspects of reduplication of FNIII repeats in the tenascin gene family" Gene. 217. 1-13 (1998)

Ikuta,T.：“小鼠生腱蛋白-X 的结构分析：生腱蛋白基因家族中 FNIII 重复重复的进化方面”基因。

Fujimoto,M.: "Characterization of an element positively regulating the transcription of MSSP gene-2 which encodes C-MYC binding proteins." Gene. 214. 113-120 (1998)

Fujimoto,M.：“对编码 C-MYC 结合蛋白的 MSSP 基因 2 转录进行正向调节的元件的表征。”

Taira,T.: "AMY-1,a novel C-MYC binding protein that stimulates transcriptional activity of C-MYC" Genes Cells. 3. 551-567 (1998)

Taira,T.：“AMY-1，一种新型 C-MYC 结合蛋白，可刺激 C-MYC 的转录活性”Genes Cells。

Tsuchiya,T.: "Ku antigen binds to Alu family DNA" J.Biochem.123. 120-127 (1998)

Tsuchiya,T.：“Ku 抗原与 Alu 家族 DNA 结合”J.Biochem.123。