一回の投与で繰り返しタンパク質を供給可能なオンデマンド型遺伝子治療システムの開発

开发可通过单次给药重复提供蛋白质的按需基因治疗系统

• 批准号: 22659009
• 负责人: 高倉 喜信
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22659009/
• 关键词: 遺伝子発現; 肝臓; 転写因子; 非ウィルスベクター; 物理刺激

治療タンパク質を"必要に応じて繰り返し"発現させる「オンデマンド型遺伝子治療システム」の実現を目的に、遺伝子発現再活性化のためのシグナルの探索を行った。大容量の等張溶液を急速に静脈内投与するハイドロダイナミクス法(HD法)により一過性発現型plasmid DNA (pDNA)を用いて遺伝子導入したのち、等張溶液をHD法に準じて投与することで、低下した発現が再上昇する遺伝子発現再活性化現象がみられること、この再活性化現象には転写因子AP-1やNF-κBの活性化が関与することを既に報告している。これらの転写因子を活性化する代表的な要因として炎症性サイトカインと活性酸素が挙げられることから、再活性化に及ぼす炎症性サイトカイン及び活性酸素の影響について検討した。HD法によって炎症性サイトカインであるインターロイキン6(IL6)が産生されることを見出したが、その産生細胞であるマクロファージを除去した場合にもHD法による再活性化現象は認められた。また、リポポリサッカライドを投与することでIL6の産生を増大させた場合には再活性化は起こらず、IL6の関与はほぼ否定された。一方、活性酸素を消去するカタラーゼあるいはN-アセチルシステインの投与によりHD法による再活性化は抑制され、その一方で、四塩化炭素の投与により活性酸素を発生させることで再活性化が認められた。従って、活性酸素レベルの制御が、オンデマンド型遺伝子治療システムの実現には有望であることを示した。

The aim of the "necessary" treatment of the disease is to explore the reactivation of the gene in the treatment of the disease. Rapid intravenous administration of large volume isotonic solution by HD method for transient plasmid DNA (pDNA) induction and rapid intravenous administration of isotonic solution by HD method This reactivation is related to the activation of AP-1 and NF-κB. The main causes of the activation of these cytokines are inflammatory cytokines and the effects of active acids on inflammation, reactivation, and inflammation. HD method is used to remove inflammatory cells. The production of IL-6 is increased in the case of reactivation of IL-6. One side, the active acid elimination, the injection, the HD method, the reactivation, the inhibition, the other side, the four carbon injection, the active acid generation, the reactivation, the reactivation. It is expected that the treatment system will be implemented in the future.

项目成果

Positive correlation between the generation of reactive oxygen species and activation/reactivation of transgene expression after hydrodynamic injections into mice.

水动力注射小鼠后，活性氧的产生与转基因表达的激活/重新激活之间呈正相关。

• 发表时间: 2011
• 期刊: Pharmaceutical Research
• 影响因子: 3.7
• 作者: Takiguchi N.;Takahashi Y.;Nishikawa M.;Matsui Y.;Fukuhara Y.;Oushiki D.;Kiyose K.;Hanaoka K.;Nagano T.;Takakura Y.
• 通讯作者: Takakura Y.