遺伝子治療を目的とした核酸医薬品のデリバリーシステムの確立

基因治疗核酸药物递送系统的建立

基本信息

批准号：
06772129
负责人：
高倉喜信
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

近年、遺伝子あるいはmRNA等に相補的な配列を持つアンチセンスDNAを細胞に送り込むアプローチが、癌やエイズなどの難治性疾患に対する遺伝子レベルでの新しい治療法として注目を集めている。現時点においては、ex vivoでこれらを標的細胞に導入した後、生体に戻す手段が中心に研究が進められているが、これら核酸を通常の医薬品と同様直接体内に投与し、標的細胞に選択的に送り込む方法論の確立が望まれている。しかしながら、核酸は生体内で極めて不安定であり細胞膜透過性、組織親和性等、多くの問題点を有するため、医薬品として実用化するためには、こうした問題点を克服することのできるデリバリーシステムの確立が必至と考えられる。本研究では、核酸医薬品の細胞特異的デリバリーシステムを開発することを最終目的に、まずプラスミドDNAおよびオリゴヌクレオチドの安定性、基本的な体内動態さらには細胞取り込み機構を検討した。これら核酸医薬品は、マウス静脈内投与後速やかに分解したが、この分解速度はマウス血液を用いたin vitro実験から予測されたよりも遥かに速く、in vivoでは血液プール以外でのコンパートメントで分解を受ける可能性が示唆された。また、投与された核酸は速やかに肝臓に取り込まれたが、種々の検討の結果、ポリアニオンを特異的に認識するスカベンジャーレセプターの関与が明らかとなった。以上の結果に基づき選択的な送達を実現し得る各種製剤学的修飾法として、cationic liposomeとの複合体の応用を試みた結果、本複合体投与によりin vivoでの遺伝子発現が達成できることが明らかとなった。以上のように、本研究の成果は核酸医薬品のデリバリーシステムを設計するための有用な基礎的情報を提供するものと思われる。

近年来，将与基因或mRNA互补序列的反义DNA发送到细胞中的方法一直吸引着对棘手疾病（如癌症和艾滋病）的新基因治疗。当前，研究主要是以将其引入靶细胞的形式，然后将其返回到活生物体中，但希望建立一种方法，其中这些核酸直接被直接施用到体内，就像常规药物一样，并选择性地泵入靶细胞。但是，由于核酸在体内非常不稳定，并且存在许多问题，例如细胞膜渗透性和组织亲和力，以便实际上用作药物，因此认为有必要建立一个可以克服这些问题的输送系统。在这项研究中，我们的最终目的是开发用于核酸药物的细胞特异性递送系统，我们首先研究了质粒DNA和寡核苷酸的稳定性，基本的体内动力学和细胞摄取机制。这些核酸药物在静脉注射小鼠后迅速降解，但是降解速率比使用小鼠血液的体外实验所预测的要快得多，这表明在体内可能会在血液库以外的腔室中降解。此外，尽管肝脏迅速吸收了施用的核酸，但各种研究揭示了专门识别多个元素的清道夫受体的参与。基于上述结果，我们试图将阳离子脂质体的复合物应用于允许选择性递送的各种药物修饰方法，并且由于复合物的应用，因此揭示了可以通过给予该复合物来实现体内基因表达。如上所述，这项研究的结果似乎为设计核酸药物的输送系统提供了有用的基本信息。