Development of technology for efficient homologous recombination by the viral vector and zincfinger nuclease

病毒载体和锌指核酸酶高效同源重组技术的开发

• 批准号: 23500491
• 负责人: YAMAGUCHI Tomoyuki
• 金额: $ 3.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23500491/
• 关键词: ゲノム編集技術; レンチウイルスベクター; CRISPR-Cas9; ZFN; TALEN; Cas9/CRISPR; 相同組み換え; CRISPR Cas9; ウイルスベクター

Recent great progress of development of genome editing technology such as ZFN, TALEN, Cas9-CRISPR enabled us to generate gene targeting mice without labor intensive work.These genome editing systems can cut the specific sequence on the genome followed by recruitment of DNA repair machinery to the digested site and enhance the homologous recombination. On the other hand, simultaneous expression of several components are necessary for genome editing by these systems and this is the drawback of these systems for efficient genome editing in primary cells. In this study, we tried to generate single lentiviral vector harboring several components of gene editing system for efficient gene edition.

近年来，基因组编辑技术如ZFN、TALEN、Cas9-CRISPR等的发展取得了很大的进步，使我们能够在不需要大量劳动的情况下制备基因打靶小鼠，这些基因组编辑系统可以切割基因组上的特定序列，然后将DNA修复机制募集到消化位点，增强同源重组。另一方面，通过这些系统进行基因组编辑需要同时表达几种组分，这是这些系统在原代细胞中进行有效基因组编辑的缺点。在本研究中，我们试图构建一个包含多个基因编辑系统组件的慢病毒载体，以实现高效的基因编辑。

项目成果

Generation of germline-competent rat induced pluripotent stem cells.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0022008
• 发表时间: 2011
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Hamanaka S;Yamaguchi T;Kobayashi T;Kato-Itoh M;Yamazaki S;Sato H;Umino A;Wakiyama Y;Arai M;Sanbo M;Hirabayashi M;Nakauchi H
• 通讯作者: Nakauchi H

Immortalization of erythroblasts by c-MYC and BCL-XL enables large-scale erythrocyte production from human pluripotent stem cells.

• DOI: 10.1016/j.stemcr.2013.10.010
• 发表时间: 2013
• 期刊: STEM CELL REPORTS
• 影响因子: 5.9
• 作者: Hirose, Sho-ichi;Takayama, Naoya;Nakamura, Sou;Nagasawa, Kazumichi;Ochi, Kiyosumi;Hirata, Shinji;Yamazaki, Satoshi;Yamaguchi, Tomoyuki;Otsu, Makoto;Sano, Shinya;Takahashi, Nobuyasu;Sawaguchi, Akira;Ito, Mamoru;Kato, Takashi;Nakauchi, Hiromitsu;Eto, Koji
• 通讯作者: Eto, Koji

異種動物体内を利用した多能性 幹細胞からの臓器、組織再生法

使用不同物种的身体的多能干细胞再生器官和组织的方法

• 发表时间: 2013
• 作者: Kanoh S.;Scherer R.;Miyamoto K.;Yoshinobu T;山口智之;加藤天美;山口智之
• 通讯作者: 山口智之

異種動物体内での臓器構築

外来动物体内的器官构建

• 发表时间: 2014
• 作者: Hamanaka S;Yamaguchi T;Kobayashi T;Kato-Itoh M;Yamazaki S;Sato H;Umino A;Wakiyama Y;Arai M;Sanbo M;Hirabayashi M;Nakauchi H.;Kato A;山口智之
• 通讯作者: 山口智之

異種動物体内を利用した多能性幹細胞からの臓器

使用不同物种身体的多能干细胞衍生的器官

• 发表时间: 2013
• 作者: Kanoh S.;Scherer R.;Miyamoto K.;Yoshinobu T;山口智之
• 通讯作者: 山口智之