Biochemische Charakterisierung und Struktur-Funktionsbeziehung der GTP-bindenden Domäne des Trans-Aktivatorproteins CIITA

反式激活蛋白CIITA GTP结合域的生化特征及结构功能关系

• 批准号: 5405025
• 负责人: Professor Dr. Matthias Geyer
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Strukturbiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2005-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5405025?language=en
• 关键词: Biochemische; Charakterisierung; und; Struktur; Funktionsbeziehung

Die Antwort des Immunsystems auf ein Antigen beinhaltet die Aktivierung der Transkription der Haupt-Histokompatibilitätskomplexe (MHC). Das 140 kDa große Protein CIITA ist hierbei der Hauptregulator für die Transaktivierung der MHC Klasse II Gene. Vor kurzem wurde gezeigt, dass CIITA eine zentrale GTP-bindende Domäne von etwa 40 kDa Größe besitzt, die die zelluläre Lokalisation des Proteins reguliert und die nur geringe Ähnlichkeit mit bisher bekannten GTP-bindenden Domänen aufweist. In dem vorliegenden Forschungsvorhaben soll diese neue GTP-bindende Domäne biochemisch charakterisiert werden. Dies beinhaltet zunächst die genaue proteolytische Bestimmung der GTP-bindenden Domäne aus CIITA und ihre Affinität für Guanosin-Nukleotide, die Analyse der Hydrolyseeigenschaften von CIITA-GTP und die dabei entstehenden Produkte. Vermutete Änderungen des Oligomerisierungszustandes von CIITA in Abhängigkeit des geundenen Nukleotids sollen überprüft werden. Durch NMR-Spektroskopie soll das GTP-Bindungszentrums analysiert werden und schließlich ist die Bestimmung der Interaktionsfläche von CIITA mit den beiden Transkriptions-Kofaktor RFXANK und RFX5 vorgesehen. Diese Arbeiten sollen begleitet werden durch kristallographische Studien münden in eine Struktur-Funktionsbeziehung der GTP-bindenden Domäne von CIITA.

免疫系统对抗原的反作用是通过主要组织相容性复合物（MHC）的转录激活的。Das 140 kDa große Protein CIITA ist hierbei der Hauptregulator für die Transaktivierung der MHC Klasse II Gene.最后，CIITA确定了一个40 kDa的GTP结合域中心，该中心的蛋白质局部化调节和仅产生一个更好的GTP结合域。在这些研究中，新的GTP结合物具有生物化学特性。本文首先对CIITA的GTP结合域及其与鸟嘌呤核苷酸的亲和力进行了一般性的蛋白水解测定，然后对CIITA-GTP的水解特性进行了分析，最后得到了相应的产物。CIITA的低聚物在核反应堆中的应用已被韦尔登。DSPNMR-Spektroskopie soll das GTP-Bindungszentrums analysiert韦尔登und schließlich is die Estimmung der Interaktionsfläche von CIITA mit den den beiden transskriptions-Kofaktor RFXANK und RFX5 vorgesehen.这些劳动者必须在CIITA的GTP绑定域的结构-功能区中通过基督徒的书写进行韦尔登。