Biochemische Charakterisierung und Struktur-Funktionsbeziehung der GTP-bindenden Domäne des Trans-Aktivatorproteins CIITA

反式激活蛋白CIITA GTP结合域的生化特征及结构功能关系

基本信息

项目摘要

Die Antwort des Immunsystems auf ein Antigen beinhaltet die Aktivierung der Transkription der Haupt-Histokompatibilitätskomplexe (MHC). Das 140 kDa große Protein CIITA ist hierbei der Hauptregulator für die Transaktivierung der MHC Klasse II Gene. Vor kurzem wurde gezeigt, dass CIITA eine zentrale GTP-bindende Domäne von etwa 40 kDa Größe besitzt, die die zelluläre Lokalisation des Proteins reguliert und die nur geringe Ähnlichkeit mit bisher bekannten GTP-bindenden Domänen aufweist. In dem vorliegenden Forschungsvorhaben soll diese neue GTP-bindende Domäne biochemisch charakterisiert werden. Dies beinhaltet zunächst die genaue proteolytische Bestimmung der GTP-bindenden Domäne aus CIITA und ihre Affinität für Guanosin-Nukleotide, die Analyse der Hydrolyseeigenschaften von CIITA-GTP und die dabei entstehenden Produkte. Vermutete Änderungen des Oligomerisierungszustandes von CIITA in Abhängigkeit des geundenen Nukleotids sollen überprüft werden. Durch NMR-Spektroskopie soll das GTP-Bindungszentrums analysiert werden und schließlich ist die Bestimmung der Interaktionsfläche von CIITA mit den beiden Transkriptions-Kofaktor RFXANK und RFX5 vorgesehen. Diese Arbeiten sollen begleitet werden durch kristallographische Studien münden in eine Struktur-Funktionsbeziehung der GTP-bindenden Domäne von CIITA.
免疫系统抗原(MHC)。Das 140 kDa große Protein CIITA ist hierbei der haupregulator f<e:1>。Vor kurzem wurde gezeight, dass CIITA eine zentrale gtp - bindent Domäne von etwa 40 kDa Größe besitzt, die die zelluläre Lokalisation des Proteins regulert and die nugeringe Ähnlichkeit mit bisher bekannten gtp - bindent Domänen aufweist。在dem vorliegenden forschungsvohaben soldiese中,研究了新的gtp - binding Domäne生物化学特性。Dies beinhaltet zunächst die genaue proteolytische beestimung der gtp - binding Domäne aus CIITA und ihre Affinität frguanosin - nucleotide, die Analyse der Hydrolyseeigenschaften von CIITA- gtp und die dabei entstehenden produckte。Vermutete Änderungen des oligomerisiungszustandes von CIITA . Abhängigkeit des gedenen Nukleotids sollen <s:1> berpr<e:1> [f] werden。荷兰nmr - spektroskie销售GTP-Bindungszentrums分析器werden和schließlich - ist die Bestimmung der Interaktionsfläche von CIITA mitden den be转录- kofaktor RFXANK和RFX5 vorgesen。[2][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1][1]。

项目成果

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