生体時計の発生分化制御に関わる遺伝子機構の解明
阐明控制生物钟发育和分化的遗传机制
基本信息
- 批准号:11F01412
- 负责人:
- 金额:$ 1.22万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2011
- 资助国家:日本
- 起止时间:2011 至 2013
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
細胞の増殖のタイミングが、抑制性キナーゼであるWee1等の制御を介し、生体時計で制御されていることは周知の事実である。今回、時計遺伝子欠損マウス(CGDマウス)での肝臓再生の異常を検索することにより、生体時計の発生分化制御にかかわる時計遺伝子機構を検索した。まず、マウス肝臓の70%部分肝切除後を施行し、野生型とCGDマウスとの、再生肝の再生能力の差を検索した。そのためにサンプリング1時間前にBrdUを投与しその時点でのDNA合成をマーキングし、術後様々な時間でサンプリングした。抗Ki67抗体にて細胞周期に入った細胞を同定し、anti-BrdU抗体やEdU-Click反応でS期の細胞を同定し、これらの二重染色により、手術後各時間におけるS期細胞比率等の変動を検討した。その結果、CGDマウスと野生型マウスには、細胞増殖効率に明らかな差は認められなかった。また、部分肝切除術後の発がん性を含む病変を検索しているが、現在までには異常が認められなかった。一部のマウスに炎症性細胞浸潤が認められた。以上の所見は、肝細胞の細胞周期を1サイクル回る時間に明らかな差が無いことをあらわすが、細胞発生が異常かどうかわからない。生体成熟肝細胞では、基本的には細胞分裂を行なわないが、発生期の肝細胞は分裂する。そこで、時計遺伝子による時計遺伝子の細胞発生への関与をより詳細に検索するため、生後3週のCGDマウスの肝臓から採取した肝細胞の初代培養を用いて細胞発生異常の検索を開始した。野生型マウスから採取した肝細胞の分裂頻度は25%-30%であったが、CGDマウスも同程度であった。この分裂頻度は、単核細胞も、2核細胞も同じであった。現在さらに、初代培養細胞系を用いて、生体時計の発生分化制御に関わる遺伝子機構を追求している。
Cell の raised colonization の タ イ ミ ン グ が, inhibitory キ ナ ー ゼ で あ る Wee1 の royal を し of interfaces, such as living body chronometer で suppression さ れ て い る こ と は known の things be で あ る. Today, when the son survived 伝 owe loss マ ウ ス (CGD マ ウ ス) で の is crucial liver regeneration の abnormal を 検 cable す る こ と に よ り, when unripe body の 発 raw differentiation suppression に か か わ る chronometer heritage 伝 child institutions を 検 cable し た. ま ず, マ ウ ス perforatien の 70% liver after partial liver resection を し, wild type と CGD マ ウ ス と の, poor regeneration of liver regeneration の の を 検 cable し た. そ の た め に サ ン プ リ ン グ one time before に BrdU を cast with し そ の point で の DNA synthesis を マ ー キ ン グ し and others in postoperative 々 な time で サ ン プ リ ン グ し た. Antibodies against Ki67 に に into っ て cell cycle を た cells with し, anti - BrdU antibody や EdU - Click the 応 で S period を の cells with し, こ れ ら の double staining に よ り, each time after the operation に お け る ratio of S phase cells such as の - move を beg し 検 た. The results of そ そ, CGD ウスと ウスと wild-type ウスに ウスに, and cell proliferation efficiency に are better than ら な な and worse than められな. ま た, after partial liver resection の 発 が を contain む ん sex disease - を 検 cable し て い る が, now ま で に は abnormal が recognize め ら れ な か っ た. A ウスに ウスに inflammatory cell infiltration が recognize められた. Seen above の は を の cells, liver cells cycle 1 サ イ ク ル る back time に Ming ら か な worse が not い こ と を あ ら わ す が, abnormal cells born 発 が か ど う か わ か ら な い. The mature hepatocytes in the living body で で, the basic に に cell division を line なわな が が, and the developed stage <s:1> hepatocyte division する. そ こ で, hour meter but 伝 に よ る chronometer heritage 伝 の cells born 発 へ の masato and を よ り detailed に 検 cable す る た め, three weeks after の CGD マ ウ ス の is crucial liver か ら take し の early generation た hepatocytes を with い て abnormal cells born 発 の 検 cable を began し た. For the wild-type ウス ウス ら ら, the <s:1> division frequency of <s:1> た hepatocytes is 25%-30%であったが, and the CGD ウス ウス is であった to the same extent. The division frequency of じであった, 単 nuclear cells <e:1>, and 2-nuclear cells <e:1> is the same as that of じであった. Now さ ら を に, original culture cell line with い て, when unripe body の 発 raw differentiation suppression に masato わ る heritage 伝 child institutions を pursuit し て い る.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Involvement of urinary bladder Connexin43 and the circadian clock in coordination of diurnal micturition rhythm.
- DOI:10.1038/ncomms1812
- 发表时间:2012-05-01
- 期刊:
- 影响因子:16.6
- 作者:
- 通讯作者:
RNA-Methylation-Dependent RNA Processing Controls the Speed of the Circadian Clock
- DOI:10.1016/j.cell.2013.10.026
- 发表时间:2013-11-07
- 期刊:
- 影响因子:64.5
- 作者:Fustin, Jean-Michel;Doi, Masao;Okamura, Hitoshi
- 通讯作者:Okamura, Hitoshi
Circadian regulation of intracellular G-protein signalling mediates intercellular synchrony and rhythmicity in the suprachiasmatic nucleus.
- DOI:10.1038/ncomms1316
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:16.6
- 作者:Doi, Masao;Ishida, Atsushi;Miyake, Akiko;Sato, Miho;Komatsu, Rie;Yamazaki, Fumiyoshi;Kimura, Ikuo;Tsuchiya, Soken;Kori, Hiroshi;Seo, Kazuyuki;Yamaguchi, Yoshiaki;Matsuo, Masahiro;Fustin, Jean-Michel;Tanaka, Rina;Santo, Yasuko;Yamada, Hiroyuki;Takahashi, Yukari;Araki, Michihiro;Nakao, Kazuki;Aizawa, Shinichi;Kobayashi, Masaki;Obrietan, Karl;Tsujimoto, Gozoh;Okamura, Hitoshi
- 通讯作者:Okamura, Hitoshi
Accurate determination of S-phase fraction in proliferative cells by dualfluorescence and peroxidase immunohistochemistry with 5-bromo-2'-deoxyuridine
双荧光和 5-溴-2-脱氧尿苷过氧化物酶免疫组织化学法准确测定增殖细胞中的 S 期分数
- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Fustin JM;Doi M;Yamaguchi Y;Hayashi H;Nishimura S;Yoshida M;Isagawa T;Suimye-Morioka M;Kakeya H;Manabe I;Okamura H;Negoro H;Doi M; Okamura H;Tanaka R; Okamura H
- 通讯作者:Tanaka R; Okamura H
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