Charakterisierung genetischer Veränderungen im Rahmen der malignen Transformation von Telomerase-immortalisierten humanen Hepatozyten

分子致病因子hepatozellulären karzinmenist nur unzureichend bekant。上皮性肿瘤的研究进展bestätigen，端粒稳定性研究进展与进展[j]。端粒酶在人类肝癌细胞和恶性肿瘤细胞培养模型中的应用。Um die Suszeptibilität端粒酶阳性Zellklone基因<e:1>恶性转化Zellklone基因和Zellklone基因在langzeitculturen自发和氧化应激条件下的表达。mittel的逆转录病毒Insertionsmutagenese sollen genetische Veränderungen indiziert werden，死于den不朽的klonenen恶性转化繁殖体。个体的恶性转化：klonenwadh - 1在体外鉴定和体内nacktmaus模型中的克隆抑制和体外鉴定bestätigt。转化酶zellkone werden在Vergleich上的翻译结果：转化酶zellen1分子、细胞遗传学和基因表达特性的研究。[1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1]

Die molekulare Pathogenese von hepatozellulären Karzinomen ist nur unzureichend bekannt. Beobachtungen in epithelialen Tumoren bestätigen, dass eine effiziente Telomerstabilisierung Voraussetzung für die Entwicklung von Karzinomen aus proliferierenden Zellen ist. Im vorliegenden Projektantrag werden Telomerase-immortalisierte humane Hepatozyten als nicht-malignes Zellkulturmodell für proliferierende Leberzellen eingesetzt. Um die Suszeptibilität Telomerase-positiver Zellklone für eine maligne Transformation zu erfassen und um die verantwortlichen Signalwege zu identifizieren, werden wir die Entstehung zytogenetischer Veränderungen in Langzeitkulturen spontan und unter oxidativen Stress untersuchen. Mittels retroviraler Insertionsmutagenese sollen genetische Veränderungen indiziert werden, die in den immortalisierten Klonen eine maligne Transformation propagieren. Maligne Transformation in individuellen Klonen wird durch einen Verlust der Kontaktinhibition und ein Wachstum im Colony-Assay in vitro identifiziert und im Nacktmaus-Modell in vivo bestätigt. Transformierte Zellklone werden dann im Vergleich zu nicht-transformierten Zellen molekular, zytogenetisch und hinsichtlich ihrer globalen Proteinexpression charakterisiert. Zur Untersuchung der Relevanz einer Telomerstabilisierung im Kontext spezifischer genetischer Veränderungen, werden wir die Telomeraseaktivität in den transformierten Klonen inhibieren, die Telomere destabilisieren und die Klone dann funktionell charakterisieren.