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ＥＢウイルスがコードするＤＮＡポリメラーゼの機能ドメインの詳細な解析

EB病毒编码的DNA聚合酶功能域详细分析

基本信息

批准号：
14J01982
负责人：
成田洋平
金额：
$ 2.03万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J01982/
关键词：
Epstein-Barr virus ウイルスゲノム複製ヘルペスウイルス EBウイルス BAC

项目摘要

本研究ではBurkitt lymphomaを引き起こす原因ウイルスであるEpstein-Barr virus(EBV)がコードするDNAポリメラーゼ(Pol)に着目し、ウイルス産生感染時のウイルスゲノム複製を詳細に解析することを目的とした。特に、ヘルペスウイルス科のウイルスがPolに保存している特徴的なアミノ酸配列に着目し、このアミノ酸配列がEBVのウイルスゲノム複製においてどのように寄与しているのかを詳細に解析することを目指した。平成２７年度までに、このEBV Polのアミノ酸配列に変異を入れた組換えウイルスおよび感染細細胞（HEK293-EBV-BAC）を樹立し、アミノ酸配列を欠失あるいは変異させたウイルス感染細胞ではウイルスゲノム複製の効率が著しく低下することを明らかにした[Narita, Y. et al. Sci. Rep. 5, 11767; doi: 10.1038]。平成２８年度では、このアミノ酸配列がヘルペスウイルス特異的なものであるため、本研究課題が抗ウイルス薬開発等へ発展する可能性が高いと考え、アミノ酸配列のウイルス複製における作用メカニズムを明らかにすることを目指した。GST pulldown法や免疫沈降法にて得られた沈降物を質量分析装置で網羅的に解析することでEBV Polのアミノ酸配列と機能的に相互作用するタンパク質の同定を目指したが、適切な条件を見つけ出すことができなかった。これらは今後の検討課題であると考えている。

In this study, we analyzed in detail the causes of Burkitt lymphoma infection and the replication of Epstein-Barr virus(EBV) in the presence of Pol. In particular, the characteristics of EBV are described in detail in the table below. In 2007, the EBV Pol was found to have a low replication rate in infected cells (HEK293-EBV-BAC) due to a lack of acid alignment.[Narita, Y.] et al. Sci. Rep. 5, 11767; doi: 10.1038]。In 2008, the possibility of development of anti-tumor development was high, and the effect of anti-tumor replication of acid alignment was indicated. GST pulldown method and immunoprecipitation method are used to analyze the sediment mass analysis equipment. The analysis results show that EBV Pol can be used for acid alignment and functional interaction. The quality of the sediment is determined according to the appropriate conditions. This is the first time I've ever been to a school.