Functional analysis of the adaptor protein CIN85 and its isoforms in vivo

接头蛋白 CIN85 及其亚型体内功能分析

• 批准号: 5428889
• 负责人: Professor Dr. Ivan Dikic
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Biochemie II
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2003-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5428889?language=en
• 关键词: Functional; analysis; adaptor; protein; CIN85

"Cbl-interacting protein of 85 kDa" (C1N85) und "CD2-associated protein" (CD2AP) sind Adapterproteine, die an einer Vielzahl von Prozessen wie Endozytose von Rezeptoren, Überleben neuronaler Zellen, Bildung der immunologischen Synapse in T-Zellen und Filtrationsprozessen in Nieren beteiligt sind. Um die physiologische und pathologische Wirkungsweise dieser Proteine besser zu verstehen, beabsichtigen wir, das CIN85-Protein inklusive seiner multiplen Varianten in der Maus durch Deletion des CIN85-Gens auszuschalten. Wir untersuchen bereits transgene Mäuse, in denen Exon 2 des CIN85-Gens deletiert wurde (CrN85-/-Dex²). Diese Mäuse bilden weder das vollständige Protein noch die überlange (xl) Isoform. Die Tiere sind lebensfähig und reproduzieren sich normal. In einigen Geweben könnte der Verlust der langen Isoformen durch die C1N85-DA- und C1N85-DABVarianten kompensiert werden, die funktionell redundant zu C1N85 und CIN85-xl sind. Die Transkription des CIN85-Gens ist durch sechs Promotoren reguliert, die über den gesamten Gen-Lokus verteilt sind. Um die Signifikanz der verschiedenen C1N85-Isoformen in vivo zu untersuchen, planen wir, C1N85-Knockout-Mäuse zu erzeugen, bei denen der gesamte C1N85-Lokus durch Anwendung des Cre/Lox-Systems deletiert wurde. CIN85 und das nahe verwandte CD2AP haben möglicherweise überlappende Funktionen, die wir anhand von C1N85/CD2AP-Doppelknockout-Tieren untersuchen wollen. Zudem scheint uns die Erzeugung und Charakterisierung von transgenen Mäusen, bei denen spezifische Isoformen ausgeschaltet wurden, notwendig. Wir planen daher, gezielt die C1N85-DA-Isoform durch Deletion von Exon 3 (C1N85-/Dex³) zu entfernen. Hingegen können alle Varianten mit SH3Domänen durch Deletion von Exon 12 (C1N85-/-Dex12) ausgeschaltet werden. Zusammenfassend sollen mit den in diesem Antrag vorgeschlagenen Experimenten die Funktionen der einzelnen C1N85-Isoformen entschlüsselt und die Auswirkung des Verlusts aller Varianten sowie des CD2AP-Proteins in vivo analysiert werden.

C1N85)和CD2相关蛋白(CD2AP)Sind AdapterProtein，死于Vielzahl von Prozessen Wie Endozytose von Rezeptoren，Überleben Neuronaler Zellen，Bildung der免疫学Synapse in T-Zellen and FiltrationsProzessen in Neren Beteigt Sind Sind。从生理学和病理学角度看，CIN85-蛋白缺失后，CIN85-蛋白的表达水平发生了变化。我们将其转基因Mäuse，in denen exon 2 des CIN85-Gens deltiert wurde(CrN85-/-Dex？)Diese Mäuse bilden Weder das vollständige蛋白质noch dieüberlange(XL)亚型。这是一件很正常的事。在本发明中，C1N85-DA-和C1N85-DABVarianten kompensiert是冗余的C1N85和CIN85-XL Sind。翻译的目的是为了促进经济发展，同时也是为了更好地保护人类的利益。以及C1N85-异构体在体内的信号，Plen wir，C1N85-Knokout-Mäuse zu-erzeugen，Be denen der Gesamte C1N85-LOKUS Durch Anwendung des CRE/Lox-Systems deltiert wurde。CIN85和Das Nahe Verwandte CD2AP haben möglicherweiseüberruppende Funktionen，die wir wir and handand von C1N85/CD2AP-dopelkackout-tieren unterushen wollen.他说：“这是一件非常重要的事情，我不知道怎么做。我们计划在第三外显子(C1N85-/Dex³)中删除C1N85-DA-异构体。Hingegen können alle Varianten MIT SH3Domänen因von Exon 12(C1N85-/-Dex12)的缺失而被删除。Zusammenfassend Sollen MIT den in Diesem Antrag vorgeschlagenEinzelnen C1N85-Isoformen entschlüsselt and die Auswirkung des Verlusts aller Varianten Sowie des CD2AP-Proteins in Inzelnen C1N85-Isoformen entschlüsselt and die Auswirkung des Verlusts aller Varianten Sowie des CD2AP-Proteins in Diesem Antrag vorgeschlagenen Examenten De Funktionen der Einzelnen C1N85-Isoformen entschlüsselt and die Auswirkung des Verlusts aller Varianten Sowie des CD